Efeito da vitamina D em embriões na fase de pré-implantação advindos de ratas diabéticas: estudos in vivo e in vitro

• Processo: 22/15285-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2023
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Débora Cristina Damasceno
• Beneficiário: Maysa Rocha de Souza
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Diabetes mellitus Gravidez Vitamina D Ratas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: diabete | pré-embrião | Pré-implantação | ratas | vitamina D | Diabete e Gestação

Resumo

Diabete materno pode ocasionar menor número de implantações embrionárias, maior taxa de morte embrionária e malformações fetais devido ao desbalanço no estado redox induzido pela hiperglicemia. Foi mostrado que a suplementação com vitamina D pode reduzir o estresse oxidativo, desempenha papel significativo no estímulo às células endócrino-pancreáticas e aumenta a sensibilidade à insulina. Além disso, há evidências da relação positiva entre o consumo materno de vitamina D e o peso ao nascer e massa óssea da prole. Sendo assim, o objetivo deste estudo será avaliar se o meio de cultura enriquecido com vitamina D trará benefícios para os pré-embriões em desenvolvimento (ensaio in vitro) após exposição à hiperglicemia materna. Pretendemos também verificar se a suplementação com vitamina D em ratas diabéticas melhora a capacidade de desenvolvimento e estado redox de pré-embriões machos e fêmeas e relacionar o dimorfismo sexual com as repercussões encontradas (ensaio in vivo). Para isso, serão utilizados modelos experimentais com ratas não-diabéticas e diabéticas Sprague-Dawley, conforme padronização em nosso laboratório. Previamente, será realizada a coleta de pré-embriões no dia 3 de prenhez advindos de um meio intrauterino diabético e serão cultivados em meio enriquecido com vitamina D para determinação de marcadores específicos (ensaio in vitro). Posteriormente, outras ratas serão utilizadas aos 110 dias de vida, que serão suplementadas com vitamina D durante 15 dias e nos primeiros três dias de prenhez. No dia 4 de prenhez, os pré-embriões serão coletados para análise morfológica, análise do estado redox e determinação do sexo cromossômico para avaliação do dimorfismo sexual. Os ovários serão retirados para contagem de corpos lúteos e determinação das perdas embrionárias antes da implantação. Todos os procedimentos serão encaminhados à Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA) de nossa Instituição. O cálculo de tamanho amostral determinou o "n" mínimo de 10 animais/grupo. Para todas as comparações estatísticas, será considerado limite mínimo de confiança de 95% (p<0,05). (AU)