| Processo: | 23/08391-0 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de julho de 2023 |
| Data de Término da vigência: | 31 de outubro de 2023 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos |
| Pesquisador responsável: | Julia Pinheiro Chagas da Cunha |
| Beneficiário: | Ana Paula de Jesus Menezes |
| Instituição Sede: | Instituto Butantan. São Paulo , SP, Brasil |
| Vinculado ao auxílio: | 18/15553-9 - Indo a fundo na regulação da cromatina de Trypanosoma cruzi: identificação de novas moléculas e questionando seu possível impacto no controle da transcrição, AP.JP2 |
| Assunto(s): | Trypanosoma cruzi |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Chromatin | Transcription | Trypanosoma cruzi | biologia de parasitos |
Resumo No JP1, nosso grupo descreveu muitas proteínas associadas à cromatina, bem como mais de 40 modificações pós traducionais (MPTs) dehistonas diferencialmente expressas em formas de vida replicativas versus não replicativas em Trypanosoma cruzi. As regiões clássicas de eu e heterocromatina estão presentes em seus núcleos e mudam dramaticamente durante a diferenciação de epimastigotas para metacíclicos (EàM). Tradicionalmente, essas regiões da cromatina (e algumas MPTs de histonas) estão associadas à regulação da transcrição. Esses conjuntos de dados, no entanto, não permitem a associação de uma determinada proteína (ou um conjunto de proteínas) a um locus genômico específico. Isso, por sua vez, aumentaria a abrangência da biologia da cromatina, possivelmente descrevendo funções imprevistas tanto da proteína quanto do contexto genômico. Recentemente, metodologias de ponta têm sido desenvolvidas para recuperar proteínas associadas a um determinado locus. Assim, aqui iremos avaliar o conteúdo de cromatina de regiões específicas do genoma de T. cruzi usando dCas9-Flag (tanto estratégias in vitro quanto in vivo) guiadas para atingir regiões genômicas específicas (ou seja, TTS, TSS, regiões teloméricas, origens de replicação, regiões promotoras de SL; 24S e rRNA de subunidade pequena (transcritos de RNA Pol I); regiões de tRNA e soRNA (transcritos de RNA Pol III)). A comparação entre o conteúdo de cromatina associada de cada locus, juntamente com a avaliação de (possíveis) mudanças durante a diferenciação EàM (e ciclo celular) pode contribuir para uma melhor compreensão dos fatores envolvidos no estabelecimento e manutenção do silenciamento/ativação gênica bem como descrever os principais componentes proteicos associados à diferenciação/ciclo celular. Finalmente, o papel dos alvos 1-2 será explorado através do sistema CRISPR/Cas9 para a geração de parasitas nocautes (KO) e proteínas marcadas | |
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