Avaliação dos efeitos do silenciamento de FASN na morfologia mitocondrial de linhagens celulares de carcinoma de células escamosas orais (SCC-9 e LN-1A).

• Processo: 22/14514-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2023
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Débora Campanella Bastos
• Beneficiário: Clara Adamoli Zaninetti Caputo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Triclosan
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carcinoma de células escamosas orais | Enzima ácido graxo sintase | Morfologia mitocondrial | triclosan | Morfologia Mitocondrial

Resumo

O carcinoma de células escamosas oral (CCEO) é o subtipo histológico mais comum de câncer oral e apresenta alto índice de metástase e baixa sobrevida para os pacientes. A forma mais comum de tratamento para CCEO é a remoção cirúrgica e, em estágios mais avançados, protocolos radioquimioterápicos podem ser indicados. A enzima ácido graxo sintase (FASN - fatty acid synthase, EC 2.3.1.85) é responsável pela síntese endógena de ácidos graxos de cadeia longa, sendo superexpressa em CCEO e associada a maior agressividade e risco de metástases para esta neoplasia. Diversos inibidores naturais ou sintéticos da FASN já foram demonstrados por conterem propriedades antiproliferativas e antineoplásicas. Resultados prévios de nosso grupo de pesquisa demonstraram que o antibiótico Triclosan (TCS), o qual é também considerado um inibidor de FASN por se ligar covalentemente a um de seus domínios catalíticos, foi capaz de reduzir a proliferação, migração, invasão e adesão das células SCC-9 mais eficientemente quando comparado aos demais inibidores testados (C75 e orlistat). De acordo com a teoria endossimbiótica do surgimento das mitocôndrias, podemos especular que a maior eficiência do TCS possa estar associada a efeitos inibitórios do TCS na FASN mitocondrial, alterando a biogênese desta organela e seu metabolismo energético. Nosso grupo de pesquisa recentemente investigou e demonstrou que o tratamento de células SCC-9 e LN-1A (derivada altamente metastática da SCC-9) com TCS resulta em alterações importantes na morfologia mitocondrial destas células. Apesar dos resultados importantes obtidos com o tratamento com TCS na morfologia mitocondrial das células malignas de CCEO, é relevante ressaltar que o TCS pode promover efeitos não específicos, ainda não descritos, nas células tumorais e no seu metabolismo mitocondrial independentes da inibição da FASN. Sendo assim, buscamos verificar os efeitos da inibição específica da FASN, através de técnicas de silenciamento gênico por short hairpin RNA (shRNA), sobre a área, perímetro, quantidade de mitocôndrias em vacúolos autofágicos, bem como a integridade de cristas mitocondriais e processos de fissão e fusão desta organela em células SCC-9 e LN-1A, derivadas de CCEO. Assim, iremos discernir e comparar essas alterações morfológicas mitocondriais, que refletem alterações funcionais decorrentes do tratamento com TCS das alterações ocasionadas pela inibição específica da FASN, através de microscopia eletrônica de transmissão e análise de imagens.