Expressão de CPD e 6-4PP fotoliases a partir da transfecção com RNA mensageiro em células deficientes em reparo de DNA

• Processo: 23/12825-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Mutagênese
• Acordo de Cooperação: Organização Holandesa para a Pesquisa Científica (NWO)
• Pesquisador responsável: Carlos Frederico Martins Menck
• Beneficiário: Mariana Centrone Zylberman
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/19435-3 - Papel de danos no DNA e função mitocondrial em envelhecimento vascular, imune e neurológico (DNA MoVINg), AP.TEM
• Assunto(s): RNA mensageiro Raios ultravioleta Xeroderma pigmentoso Reparo do DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cpd | Fotoliases | RNA mensageiro | ultravioleta | Xeroderma Pigmentosum | 6-4Pp | Reparo de DNA

Resumo

Existem no ambiente diversos fatores danosos ao DNA, sendo um dos principais deles a radiação ultravioleta (UV) componente da luz solar. Os principais tipos de lesões formadas pela exposição à UV são os dímeros de pirimidinas ciclobutano (CPDs) e os 6-4 pirimidina pirimidona (6-4PPs) que, na maioria dos organismos, são reparadas com eficiência por fotoliases específicas para cada tipo de lesão. Entretanto, tais enzimas não são encontradas em mamíferos placentários de modo que empregam a via de reparo por excisão de nucleotídeos (NER) para a remoção desses fotoprodutos da molécula de DNA. Em uma sub-via de NER, de reparo genômico global (GGR), as lesões são reconhecidas pela proteína XPC que promove o recrutamento das outras proteínas de NER. Mutações nesta proteína são responsáveis por deficiência na sub-via de GGR e manifestação clínica de Xeroderma Pigmentosum, uma doença caracterizada por alta frequência de lesões, inclusive câncer, nas regiões da pele expostas à luz solar. Sob este prisma, propõe-se desenvolver a estratégia de expressão de CPD e 6-4PP fotoliases em células provenientes de paciente com XP-C, através da transfecção de RNAs mensageiros (mRNAs) que codificam essas proteínas. A ação dessas enzimas na fotorremoção específica de CPDs ou de 6-4PPs, permitirá investigar o papel de cada uma dessas lesões no processo de mutagênese em condições de ausência de reparo. (AU)