Estudo de cinética enzimática e triagem de compostos como candidatos a inibidores da enzima piruvato quinase II (PKII) de Plasmodium falciparum

• Processo: 23/10023-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Rafael Victorio Carvalho Guido
• Beneficiário: João Pedro Salazar Martins
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07600-3 - CIBFar - Centro de Inovação em Biodiversidade e Fármacos, AP.CEPID
• Assunto(s): Cinética enzimática Bioensaio Fármacos Inibidores Malária Plasmodium falciparum Química médica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cinética Enzimática | ensaios biológicos | fármacos | inibidores | malária | Plasmodium falciparum | química medicinal

Resumo

A malária é uma parasitose letal com prevalência mundial e apesar dos investimentos em busca de novas terapias ainda é observado uma alta taxa de mortalidade. Na busca de novos candidatos a fármacos antimaláricos, a modulação da via glicolítica tem sido explorada como alvo para inibir o desenvolvimento do parasito e combater a infecção. A enzima piruvato quinase II de Plasmodium falciparum (PfPKII) é um alvo atrativo da via glicolítica do parasito que catalisa a conversão de fosfoenolpiruvato (PEP) e ADP em piruvato e ATP. Esta enzima está localizada no apicoplasto do parasito e é essencial para o funcionamento da organela, participando em processos envolvidos na biossíntese de ácidos graxos do tipo II. Tendo em vista a importância das enzimas glicolíticas no metabolismo do parasito, bem como a necessidade de novos alvos validados em P. falciparum para o desenvolvimento de a fármacos para a malária, esta proposta visa a descoberta de inibidores de PfPKII a partir de coleções disponibilizadas pela organização sem fins lucrativos "Medicines for Malaria Venture" (MMV). Resultados preliminares indicam que os protocolos padronizados foram eficientes para a expressão solúvel e purificação da PfPKII com teor de pureza adequado para a realização de ensaios cinéticos e triagens biológicas. Uma vez identificados os inibidores, suas propriedades inibitórias (valores de IC50, Ki e mecanismo de inibição) serão investigadas para a confirmação e validação como hits para a descoberta de novos candidatos a compostos líderes para a malária. Portanto, esta proposta de pesquisa contribuirá para o avanço na luta contra a malária e no desenvolvimento de tratamentos eficazes para esta doença devastadora.