Expressão das proteínas stats na diferenciação das células tcd4+ naive em modelo experimental de sobreposição de asma e doença pulmonar obstrutiva crônica.

• Processo: 23/13626-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Fernanda Degobbi Tenorio Quirino dos Santos Lopes
• Beneficiário: Ana Luiza Porfirio da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/02537-5 - Caracterização da síndrome de sobreposição asma-DPOC (ACOS): estudos experimentais e clínicos, AP.TEM
• Assunto(s): Asma Doença pulmonar obstrutiva crônica Modelo experimental Clínica médica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Asma | células tcd4+ naive | Dpoc | modelo experimental | proteinas stats | Clinica Médica

Resumo

Pacientes asmáticos apresentam um perfil de resposta Th2, com aumento de células TCD4+ e aumento de eosinófilos ao redor das vias aéreas, enquanto que pacientes DPOC apresentam um perfil de resposta imunológica Th1, aumento de células TCD8+ e aumento de neutrófilos (Brusselle et al.,2011; Cosio et al., 2009). Nosso grupo já demonstrou em estudos em modelo experimental de DPOC e em tecidos de pacientes DPOC, o papel da resposta TH17 na progressão desta doença com diminuição das células Tregulatórias (Sales et al., 2017; Ito et al., 2019; Lorenço et al., 2021). Neste sentido, teremos como objetivo neste estudo avaliar em modelo de sobreposição de asma e DPOC o papel da imunidade adaptativa neste processo, avaliando mais especificamente o papel da resposta Th17 e Th2 neste processo, bem como o envolvimento das proteínas intracelulares STAT (do inglês "Activator of Transcription Protein") na diferenciação das células TCD4+ naive em seus subtipos. Serão utilizados 6 camundongos BALB/c machos distribuídos em quatro grupos experimentais: grupo SF: inalações com soro fisiológico estéril; grupo OVA: inalações com solução de ovoalbumina (Toledo et al., 2013); grupo ELA: instilações intratraqueal de elastase (Ikeda et al., 2014); grupo ACOS: inalações com solução de OVA e instilações intratraqueais de elastase (junção dos protocolos anteriores). O tecido pulmonar extraído será fixado e corado por técnica de imuno-histoquímica para os seguintes anticorpos: Stat3, p-Stat3, Stat5, IL-17, FOXP3. A avaliação da expressão destes marcadores nos cortes histológicos será por técnica de morfometria de contagem de pontos (Weibel, 1963) com o retículo de 100 pontos e 50 retas acoplado à ocular do microscópio (Toledo et al., 2013; Righetti et al., 2014; Theodoro-Júnior et al., 2017). As análises estatísticas serão realizadas através do software Sigma Stat 11.0. O teste de Shapiro-Wilk será utilizado para determinar a distribuição dos dados. Dependendo da distribuição dos dados: uma análise de variância unidirecional seguida pelo teste post hoc de Tukey ou Kruskal-Wallis seguida pelo teste de Dunns será usada para comparar os grupos. Um valor de p<0,05 será considerado estatisticamente significativo.Sales, D. S. et al. Regulatory T-Cell Distribution within Lung Compartments in COPD. COPD J. Chronic Obstr. Pulm. Dis. 14, 533-542 (2017).Ito, J. T. et al. Th17/Treg imbalance in COPD progression: A temporal analysis using a CS-induced model. PLoS One (2019) doi:10.1371/journal.pone.0209351Ito JT, De Brito Cervilha DA, Lourenço JD, Gonçalves NG, Volpini RA, Caldini EG, et al. Th17/Treg imbalance in COPD progression: A temporal analysis using a CS-induced model. PLoS One. 2019;14(1):1-19.Lourenço JD, Ito JT, Martins M de A, Tibério I de FLC, Lopes FDTQ dos S. Th17/Treg Imbalance in Chronic Obstructive Pulmonary Disease: Clinical and Experimental Evidence. Front Immunol. 2021;12(December):1-11.Brusselle, G.G., et al. New insights into the immunology of chronic obstructive pulmonary disease. Lancet, 2011. 378(9795): p. 1015-26. Cosio, M.G., et al. Immunologic aspects of chronic obstructive pulmonary disease. N Engl J Med, 2009. 360(23): p. 2445-54.Toledo, A.C., et al. Flavonone treatment reverses airway inflammation and remodelling in an asthma murine model. Br J Pharmacol, 2013. 168(7): p. 1736-49. Ikeda, G., et al. Effect of a cysteinyl leukotriene receptor antagonist on experimental emphysema and asthma combined with emphysema. Am J Respir Cell Mol Biol, 2014. 50(1): p. 18-29.Theodoro-Júnior OA, et al. A Plant Proteinase Inhibitor from Enterolobium contortisiliquum Attenuates Pulmonary Mechanics, Inflammation and Remodeling Induced by Elastase in Mice. Int J Mol Sci. 2017 ,18(2).