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Efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana associada a antifúngicos contra Candida auris multirresistente estudos in vitro e in vivo em Galleria mellonella

Processo: 23/13826-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de novembro de 2023
Vigência (Término): 31 de outubro de 2025
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Física
Pesquisador responsável:Cristina Kurachi
Beneficiário:Lívia Mara Alves Figueiredo Godoi
Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:13/07276-1 - CEPOF - Centro de Pesquisa em Óptica e Fotônica, AP.CEPID
Assunto(s):Radiologia   Fotobiologia   Azul de metileno   Terapia fotodinâmica   Antifúngicos   Candida auris   Galleria mellonella
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:azul de metileno | Candida auris | Galleria mellonella | Photodithazine | Resistência fúngica a multidrogas | Terapia Fotodinâmica | Radiologia e Fotobiologia

Resumo

A espécie Candida auris é considerada um patógeno emergente, foi reportada pela primeira vez em 2009 na Ásia, e se expandiu rapidamente como importante causa de infecções graves ao redor do Mundo. No Brazil, as primeiras leveduras de C. auris foram identificadas em dezembro de 2020. Diferente das demais espécies de Candida, C. auris é colonizadora da pele, apresenta elevada taxa de transmissibilidade e alto grau de resistência aos antifúngicos. Em 2022 a Organização Mundial de Saúde classificou essa espécie fúngica como prioritária para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas urgentes. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) atualmente é considerada uma alternativa promissora para tratamento de microrganismos multirresistentes (MDR), como C. auris. A aplicação dessa terapia nas infecções fúngicas, produz danos na membrana celular do fungo podendo aumentar sua permeabilidade e sensibilidade aos antifúngicos. Assim o presente estudo tem como objetivo, avaliar o efeito da TFDa associada a antifúngicos sobre cepas de C. auris MDR por estudos in vitro e in vivo no modelo experimental de G. mellonella. Para isso cepas clínicas de C. auris MDR, identificadas por biologia molecular ou MALDI-TOF, serão submetidas ao teste de concentração inibitória mínima ao Fluconazol e a Caspofungina. As cepas serão investigadas quanto a sua capacidade de formação de agregados. Os efeitos da TFDa mediada por azul de metileno e Photodithazine® associada ao uso de antifúngicos serão verificados sobre as cepas de C. auris MDR, em cultura planctônica e biofilmes, pelo ensaio de contagem de unidades formadoras de colônia. Em seguida, esses efeitos serão testados no modelo in vivo de G. mellonella infectada de forma sistêmica por cepas de C. auris MDR, pelos ensaios de curva de sobrevivência, índice de saúde larval e recuperação de carga fúngica larval. Os dados obtidos nos testes de culturas planctônicas, biofilmes, índice de saúde larval e recuperação de UFC/ g das larvas serão submetidos a testes de normalidade, e serão analisados por ANOVA e Tukey, se considerados paramétricos, ou por Kruskal-Wallis e Dunn, se não paramétricos. Para os ensaios de curva de sobrevivência em G. mellonella, será utilizado o método Kaplan-Meier, com Log-rank (Mantel-Cox). O programa GraphPad Prism 9.0 será usado para todas as análises estatísticas, com nível de significância de 5%. (AU)

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