Prospecção dos efeitos da 4-metil esculetina na produção in vitro de embriões bovinos: potencial efeito antioxidante

• Processo: 23/17455-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira
• Beneficiário: Isabela Batista de Castro Nunes
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/11747-6 - Remota ou presencial: a importância da comunicação nos processos reprodutivos, AP.TEM
• Assunto(s): Antioxidantes Técnicas in vitro Maturação in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antioxidante | cultivo in vitro | Cumarínico | embrião bovino | maturação in vitro | 4-metil esculetina | produção in vitro de embriões bovinos

Resumo

Na espécie bovina, a produção in vitro de embriões (PIVE) é uma biotecnologia em crescente demanda nos últimos anos, com constante busca pelo desenvolvimento de novidades técnicas ou de insumos. O objetivo final é a melhoria da qualidade do embrião (blastocisto) e, consequentemente, a sua capacidade em tolerar a criopreservação e sustentar a gestação a termo. Entretanto, um dos problemas inerentes da PIVE é o estresse oxidativo, pela geração espécies reativas de oxigênio (ROS) a partir da exposição a elementos externos como luz ambiente e ar atmosférico. Várias estratégias para mitigar o estresse oxidativo já foram testadas, porém, até o momento, nada foi explorado sobre a capacidade antioxidante de derivados da cumarina na PIVE em bovinos. A 4-metilesculetina é uma hidroxicumarina que já demonstrou um efeito antioxidante em estudos com células não embrionárias. Este estudo tem, como objetivo, utilizar a 4-metilesculetina (4-ME) durante as etapas da maturação (MIV) e do cultivo in vitro (CIV) da PIVE. No Experimento 1, serão utilizadas concentrações de 0 (controle), 50, 100 e 200¼M de 4-ME na MIV (4 a 5 replicatas) e no CIV (4 a 5 replicatas). Para avaliar um eventual efeito embriotóxico, as taxas de blastocisto (D7-8) e de eclosão (D9) serão comparadas com o grupo controle. Após isso e caso haja algum indício promissor com o uso de 4-ME (Experimento 1), a maior concentração que não apresentar indícios de toxicidade (quando usadas tanto na MIV quanto no CIV) será escolhida para o Experimento 2. Neste, será mensurada a abundância de ROS ao término da MIV (oócitos; 3 replicatas) e do CIV (blastocistos em D7; 3 replicatas). A análise estatística será realizada com testes paramétricos (caso os dados sejam normais) para quatro grupos (ANOVA, Experimento 1) e para dois grupos (teste t de Student, Experimento 2) e nível de significância de 5%.