Produção de lotes em ambiente laboratorial e ambiente relevante (BPL) da Imunaspar, biofármaco utilizado no tratamento de neoplasias, para testes de formulação, estabilidade e estudos não-clínicos.

• Processo: 24/02493-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Renata Bannitz Fernandes
• Beneficiário: Maria Beatriz Nóbrega Lopes
• CNAE: Pesquisa e desenvolvimento experimental em ciências físicas e naturais ; Atividades profissionais, científicas e técnicas não especificadas anteriormente
• Vinculado ao auxílio: 23/13176-1 - Produção de lotes piloto em BPL e estudos não-clínicos de uma nova asparaginase conjugada com PEG para o tratamento de neoplasias, AP.PIPE
• Assunto(s): Asparaginase Biofármacos Bioprocessos Doenças raras
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: asparaginase | biofármacos | bioprocessos | doenças raras | Leucemia linfóide aguda (LLA) | Testes não-clínicos | Desenvolvimento de Biofármacos/Bioprocessos

Resumo

Neste projeto, a Imunaspar, uma L-asparaginase, será produzida e purificada usando a cepa de E. coli BL21(DE3) ”asnA/asnB. A produção começa com a clonagem do gene EcAII P40S/S206C em um vetor específico. A cepa recombinante será cultivada em meio definido e posteriormente usada para inocular um fermentador de 10 L. A produção será induzida com IPTG após o esgotamento da glicose. A etapa de purificação envolve várias operações unitárias, incluindo microfiltração e ultrafiltração, seguidas pela cromatografia de troca aniônica e cromatografia de exclusão molecular. Além disso, a Imunaspar será PEGuilada e submetida a uma segunda cromatografia de exclusão molecular.O controle de qualidade será feito de acordo com a Farmacopeia, com a determinação da concentração de proteína pelo método BCA e a avaliação da atividade da Imunaspar usando o método Nessler. A pureza será verificada por eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida, e a estrutura será caracterizada por dicroísmo circular. As propriedades de tamanho de partícula são medidas por dispersão dinâmica de luz. A formulação final será determinada com base em testes de estabilidade que seguem diretrizes regulatórias.Este projeto visa garantir a produção de Imunaspar de alta qualidade e estabilidade, essencial para seu uso nos estudos não-clínicos, e análises das amostras obtidas dos estudos in vivo. Cada etapa é cuidadosamente planejada e executada para atender aos padrões de qualidade e regulatórios necessários.