Análise dos efeitos antitumorais do sesquiterpeno aromadendreno em células de melanoma murino e humano e avaliação do efeito protetor in vivo.

• Processo: 24/01135-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Denise Costa Arruda
• Beneficiário: Maria Eduarda Rafful Pinto da Cunha
• Instituição Sede: Pró-Reitoria Acadêmica. Universidade de Mogi das Cruzes (UMC). Campus da Sede Mogi das Cruzes. Mogi das Cruzes , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias Compostos bioativos Melanoma Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aromadendreno | câncer | Compostos Naturais | Efeito Antitumoral | melanoma | terpeno | Biotecnologia

Resumo

O melanoma é o câncer de pele originado a partir de mutações em melanócitos, células presentes na camada basal da epiderme. Embora tenha baixa incidência, esse tipo de câncer possui uma alta taxa de mortalidade devido ao seu potencial metastático. A morte celular, é um processo fundamental para o desenvolvimento e manutenção das células. Entretanto, células tumorais podem apresentar resistência a este mecanismo. Os tipos de morte celular mais estudados são apoptose, necroptose, necrose e autofagia. Vários estudos têm mostrado a atividade antitumoral de compostos naturais que induzem a morte celular por apoptose através do acúmulo de espécies reativas de oxigênio. O aromadendreno, é um sesquiterpeno que tem mostrado ser bastante promissor para o tratamento de alguns tipos de câncer. O objetivo principal deste projeto é avaliar a atividade antitumoral do aromadendreno, derivado do Eucalyptus globulus, em células de melanoma murino B16F10-Nex2 e melanoma humano A375. Para avaliar o efeito citotóxico do aromadendreno, bem como, o mecanismo de ação deste terpeno na presença dos inibidores de morte e inibidores de espécies reativas de oxigênio, serão realizados ensaios de viabilidade celular com o corante de exclusão Trypan Blue. Ensaios de microscopia de fluorescência em células tratadas com o terpeno e marcadas com os fluoróforos DHE (diidroxietídio), TUNEL e PI (iodeto de propídio) serão realizados para analisar o aumento dos níveis do ânion superóxido, fragmentação do DNA e permeabilização da membrana plasmática, respectivamente. Para investigar o mecanismo de ação do aromadendreno no processo associado a formação de metástase do melanoma, bem como, sua capacidade de interferir na proliferação, colonização e invasão celular, serão realizados os ensaios de migração e invasão celular, bem como o ensaio clonogênico. O ensaio de Western Blotting será feito para investigar a alteração na expressão de proteínas relacionadas ao processo de morte em células tratadas como aromadendreno. Modificações morfológicas induzidas pelo terpeno serão avaliadas por microscopia eletrônica de transmissão. O efeito protetor in vivo do aromadendreno será avaliado através do modelo metastático em camundongos C57BL/6.