Verificação da manifestação do efeito warburg na evolução da doença de chagas

• Processo: 24/05878-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 14 de julho de 2024
• Data de Término da vigência: 13 de agosto de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Luciamare Perinetti Alves Martins
• Beneficiário: Verônica Pedrosa Zandoná
• Supervisor: Marco Aurelio Gouveia Alves
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Marília (FAMEMA). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). Marília , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universidade de Aveiro (UA), Portugal
• Vinculado à bolsa: 23/09531-0 - Alterações do metabolismo da glicose na doença de Chagas: Efeito Warburg., BP.IC
• Assunto(s): Doença de Chagas Efeito Warburg Glutamatos Trypanosoma cruzi Infectologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bcaa | Doença de Chagas | efeito Warburg | glicólise aeróbica | glutamato | Trypanossoma cruzi | Infectologia

Resumo

A doença de Chagas é uma antropozoonose endêmica em 21 países das Américas, cujo agente etiológico é o protozoário Trypanosoma cruzi (T. cruzi). Após a infecção, os parasitas iniciam uma reprogramação metabólica com a intenção de acelerar a multiplicação intracelular, optando por uma via energética mais rápida para obtenção do ATP, como a via da glicólise aeróbica, caracterizando o efeito Warburg, semelhante ao descrito no processo de carcinogênese. No entanto, na doença de Chagas, acredita-se que o efeito advenha da inflamação desenvolvida pelo protozoário nas células do hospedeiro que culmina em estresse oxidativo. Tem sido sugerido que o acúmulo de radicais livres altera os substratos disponíveis para síntese de ATP, o que promove um shift metabólico na fosforilação oxidativa para a via da glicólise aeróbica produzindo piruvato e lactato, mesmo na presença de altas concentrações de oxigênio. Contudo, além da glicose, acredita-se que os aminoácidos de cadeia ramificada (BCAA) e a glutamina sejam importantes fontes de carbono e nitrogênio no contexto de rápida multiplicação celular do câncer e também em processos inflamatórios como o da doença de Chagas, o que justificaria a síndrome consumptiva que se manifesta nessas patologias. Desta forma, 60 camundongos Swiss foram infectados com 5x104 formas tripomastigotas sanguíneas da cepa QM2 de T. cruzi, os quais foram divididos em três grupos de 20 animais para o estudo aos 30, 60 e 120 dias pós infecção. Cada grupo foi subdividido em dois lotes, sendo um lote de 10 animais para o controle e o outro lote de 10 animais infectados pela cepa QM2 de T. cruzi. Após 10 dias da infecção, foi observado uma gota de sangue da cauda para verificação do sucesso da infecção através de exame a fresco. Ao final de cada período experimental, todos os animais foram eutanasiados e foram coletados tecidos do coração (átrio)e intestino (colón), os quais foram armazenados a -80ºC, posteriormente os tecidos foram liofilizados para os testes de peroxidação lipídica (TBARS), carbonilação e nitracão para detectar danos promovidos pelo stress oxidativo nas proteínas e lipídios. Para além disso, será feita uma análise metabólica dos tecidos utilizando Ressonância magnética Nuclear de Prótons (1H-NMR), com particular foco em metabólitos da glicólise e ciclo de Krebs como Piruvato, Lactato, Alanina, Citrato, entre outros. Serão ainda detectados os aminoácidos presentes como BCAA (valina, leucina e isoleucina) e Glutamina, além de derivados do seu metabolismo. Estas tarefas serão realizadas no Departamento de Ciências Médicas da Universidade de Aveiro, Portugal. Esperamos correlacionar asdeterminações bioquímicas durante a evolução da doença de Chagas com a possível manifestação do efeito Warburg nos animais parasitados e com isso identificar alvos metabólicos para mitigar os efeitos da reprogramação metabólica induzida pela infecção.