Modulação da expressão de miR-146b por edição gênica com CRISPR/Cas9 em carcinoma papilífero de tiroide

• Processo: 24/04546-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Edna Teruko Kimura
• Beneficiário: Geovanna de Paula
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias da glândula tireoide Edição de RNA MicroRNAs Endocrinologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de tireoide | edição gênica | microRNA | miR-146b | Endocrinologia

Resumo

A metodologia CRISPR/Cas9 surgiu como uma ferramenta promissora para a modificação precisa de sequências de DNA em todo o genoma. Recentemente, no Reino Unido, foi aprovada a terapia Casgevy, que utiliza o sistema CRISPR/Cas9 em pacientes com anemia falciforme e a talassemia. No contexto oncológico, o CRISPR/Cas9 vem sendo aplicado na investigação ddo câncer, como o câncer de tireoide (TC), modulando genes codificantes e não codificantes em modelos experimentais in vitro e modelos animais. O carcinoma papilífero da tireoide (PTC) é o histotipo mais frequente e apresentam alterações em genes codificantes e genes não codificantes, como os microRNAs (miRNAs). Dentre todos os miRNAs desregulados, miR-146b é o mais altamente expresso no PTC, sendo associado à sua agressividade tumoral e sobrevida. Neste projeto visamos avaliar o silenciamento por edição gênica do oncomiR miR-146b utilizando diferentes sgRNAs para modificar o gene MIR146b, localizado no cromossomo 10, utilizando o sistema CRISPR/Cas9 em linhagem celular de PTC. Avaliaremos os níveis de expressão de genes modulados por miR-146b em diferentes clones gerados após o silenciamento. Além disso, para acessar o efeito do silenciamento da expressão de miR-146b, investigaremos a influência do na proliferação, migração e viabilidade celular. A aplicação do CRISPR/Cas9 para modular o miR-146b abre novas possibilidades para a compreensão do papel deste microRNA na biologia tumoral do PTC e de utilização na prática clínica no futuro.