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Delineamento do mecanismo de ação de peptídeos excitatórios pré-sinápticos do veneno de Bothrops bilineatus smaragdinus (Viperidae: Crotalinae) sobre a modulação de canais iônicos de neurônios periféricos

Processo: 23/18237-9
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Pesquisa
Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2025
Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2026
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Farmacologia - Toxicologia
Pesquisador responsável:Rafael Stuani Floriano
Beneficiário:Rafael Stuani Floriano
Pesquisador Anfitrião: Robert Maxwell Drummond
Instituição Sede: Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação. Universidade do Oeste Paulista (UNOESTE). Presidente Prudente , SP, Brasil
Instituição Anfitriã: University of Strathclyde, Escócia  
Assunto(s):Peptídeos biologicamente ativos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Correntes perineurais | Eletrofisiologia celular | Mobilização de cálcio intracelular | Modulação de canais iônicos | peptídeos biologicamente ativos | Veneno de Bothrops (Viperidae: Crotalinae) | Venenos e toxinas animais

Resumo

O veneno de Bothrops bilineatus smaragdinus (Viperidae: Crotalinae) induz dois fenômenos em preparação nervo-músculo de mamífero: 1) uma facilitação neuromuscular, mediada por uma fração de peptídeos (P8), imediatamente seguida por um 2) bloqueio neuromuscular irreversível, majoritariamente mediado por uma fosfolipase A2 pré-sinapticamente ativa (Bbil-TX). A toxinologia da fração P8 deste veneno não foi estudada sistematicamente. Neste trabalho pretendemos delinear o mecanismo de ação de dois peptídeos excitatórios pré-sinápticos (P8-1 e P8-2) do veneno de B. b. smaragdinus (Viperidae: Crotalinae) na modulação de canais iônicos de neurônios periféricos utilizando abordagens eletrofisiológicas (registros de correntes perineurais e whole cell patch-clamp) e ensaios celulares (mobilização de Ca2+ intracelular) em tecidos e cultura de células expostas aos peptídeos. Especificamente, no que diz respeito ao período a passar no exterior, o principal objetivo será aperfeiçoar competências e ganhar experiência na programação e execução de protocolos experimentais com patch-clamp. Isto será conseguido por meio da investigação da atividade pré-sináptica dos peptídeos sobre a neurotransmissão periférica, seguindo os seguintes aspectos: (1) neurônios de DRG em cultura primária serão utilizadas para examinar a atividade dos peptídeos em correntes iônicas isoladas (Na+, K+ e Ca2+) em configuração whole cell patch-clamp, (2) células DRG e preparações de nervo-músculo triangular esterno de camundongo serão usadas para avaliar o papel da mobilização intracelular de Ca2+ em resposta aos peptídeos usando fluorescência para imagem de Ca2+, e (3) preparações nervo-músculo triangular esterno de camundongo serão usadas para examinar a ação dos peptídeos sobre as correntes perineurais. Os resultados obtidos neste estudo deverão contribuir para a compreensão dos mecanismos envolvidos na atividade excitatória pré-sináptica de peptídeos isolados deste veneno.

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