Estratégias de quimioterapia direcionada para a eliminação das celulas-tronco tumorais em pacientes jovens com carcinoma espinocelular oral

• Processo: 23/13797-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Pablo Agustin Vargas
• Beneficiário: Sebastião Silvério de Sousa Neto
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/05710-4 - Disrupção da resistência tumoral através de terapia direcionada a depleção de células tronco tumorais em carcinomas espinocelulares de cabeça e pescoço, AP.TEM
• Assunto(s): Adulto jovem Emetina Modelos animais Xenoenxertos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: adulto jovem | Câncer de língua | Emetina | Ensaio antitumoral | Modelo Animal | Xenoenxerto | Patologia Oral e Maxilofacial

Resumo

Está sedimentado na literatura que as células tronco tumorais (CTTs) apresentam importante participação no insucesso do tratamento do câncer em região de cabeça e pescoço, pois elas têm se mostrado menos sensíveis às terapias convencionais e se mantém viáveis após o tratamento quimio e radioterápico, permitindo a recidiva do tumor e as metástases. Resultados recentes demonstraram que a utilização de Emetina e SAHA (Ácido suberanilohidroxâmico) reduz a população de CTTs em carcinomas mucoepidermoides, além de tornar o tumor susceptível a cisplatina, no entanto, não há ainda estudos do efeito destas drogas já aprovadas para uso clínico, em carcinomas de células escamosas (CEC). Recentes evidências têm mostrado que carcinomas de língua oral (CLO) de pacientes jovens apresentam mutação na enzima transcriptase reversa da telomerase (hTERT) que confere as características de CTTs. Esta associação pode beneficiar pacientes jovens que apresentem super expressão de hTERT a partir do tratamento direcionado as CTTs.Objetivos: Avaliar in vivo a partir de modelos animais o efeito dos inibidores de histona desacetilases (iHDACs) e da fosforilação do IkB± (NFkB super repressor) associado à quimioterapia com Cisplatina no tratamento do CLO caracterizando a população de CTTs e as modificações epigenéticas.Metodologia: Trata-se de um estudo in vivo com modelos animais, que receberão xenoenxerto (PDX - xenoenxertos derivados de pacientes) de pacientes jovens (18-40 anos) diagnosticados com CLO e tratados com cirurgia no Serviço de Cabeça e Pescoço do Instituto do Câncer do Estado de São Paulo. Todos os experimentos in vivo serão realizados no Biotério do Centro de Medicina Nuclear da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Os PDXs de CECL serão implantados no dorso de camundongos NOD/SCID que serão tratados com SAHA (iHDAC) e Emetina (iIkB±), em combinação com Cisplatina. A resposta clínica dos tumores será monitorada diariamente para acompanhar a alteração do volume tumoral. Após o tratamento, remoção dos tumores e eutanásia dos animais, as lesões serão avaliadas por citometria defluxo (ALDH e CD44) para verificar a atividade de CTTs. As células tumorais também serão avaliadas por citometria de fluxo, por fixação com BrdU combinado com coloração de DNA total com iodeto de propídeo, para avaliar as fases do ciclo celular nas células tumorais presentes. Para avaliação da manutenção de CTTs a partir da expressão gênica, será utilizada a modificação de histonas (ac.H3), com a realização de imunoprecipitação da cromatina seguido pelo sequenciamento. Estes tumores serão processados e a cromatina isolada e preparada para ChIP. Serão utilizados anticorpos previamente validados para ChIP para a imunoprecipitação da cromatina. A cromatina imunoprecipitada será posteriormente sequenciada usando um sequenciador de última geração.Resultados esperados: Espera-se demonstrar que a supressão das células-tronco tumorais (CTTs) e a intervenção na fosforilação do IkB±, através da utilização prévia de SAHA e Emetina antes da aplicação do agente intercalante (Cisplatina), poderiam impedir o desenvolvimento de uma resistência quimioterapêutica no CECL. Ao eliminar as CTTs e interferir na fosforilação do IkB±, acreditamos que as células tumorais restantes se tornarão suscetíveis à ação da Cisplatina.