Vesiculas extracelulares derivadas de células infectadas por SARS-CoV2 induzem alterações neuroplasticas em culturas neuronio-gliais derivadas do neuroepitélio olfativo humano.

• Processo: 24/18340-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 17 de fevereiro de 2025
• Data de Término da vigência: 16 de agosto de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Neuropsicofarmacologia
• Pesquisador responsável: Alline Cristina de Campos
• Beneficiário: Bruno Lemes Marques
• Supervisor: Leyre Uriguen Echeverria
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universidad del País Vasco, Bizkaia (UPV), Espanha
• Vinculado à bolsa: 23/05979-7 - O canabidiol atenua os efeitos cognitivos de longo prazo produzidos pela via de sinalização mediada por exossomos derivados de células neurais infectadas com SARS-CoV-2: padronização de um modelo cognitivo de COVID longa., BP.DR
• Assunto(s): Plasticidade neuronal SARS-CoV-2 Vesículas extracelulares Neurociências
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: COVID longa | neuroepitélio olfativo | Neuroplasticidade | Sars-Cov2 | vesículas extracelulares | Neurociências

Resumo

À medida que a incidência de novas infecções por Síndrome Respiratória Aguda Grave Coronavírus 2 (SARS-CoV-2) diminuiu, a Organização Mundial da Saúde declarou que a pandemia de SARS-CoV-2 acabou. No entanto, o impacto desse surto viral pode durar mais tempo com a ocorrência de sintomas neurológicos e psiquiátricos em pessoas infectadas com SARS-CoV-2 vários meses após a exibição dos sintomas respiratórios primários. Um mecanismo significativo para a disseminação de partículas virais é a produção e distribuição de vesículas extracelulares (EVs). EVs são nanopartículas secretadas por vários tipos de células que desempenham um papel fundamental na comunicação intercelular. Estudos recentes revelaram mudanças composicionais na carga de EV circulante, tanto ao longo do curso longitudinal da doença quanto em diferentes estágios de gravidade da COVID-19. As mudanças induzidas por SARS-CoV-2 na composição de EV podem estar associadas ao aumento da neuroinvasividade e à produção de fatores pró-inflamatórios, o que pode levar a alterações neurológicas ligadas a processos neuroinflamatórios. Curiosamente, estudos demonstraram que o canabidiol (CBD), um fitocanabinoide não psicotomimético derivado da Cannabis sativa, atenua processos neuroinflamatórios e alivia deficiências cognitivas em modelos animais de doenças neurodegenerativas. Considerando que mediadores inflamatórios persistentes e neuroinflamação podem explicar sintomas neurológicos e psiquiátricos na COVID longa, o tratamento com CBD pode oferecer efeitos neuroprotetores e aliviar esses sintomas. Dessa forma, levantamos a hipótese de que as vesículas extracelulares são essenciais nos mecanismos de neuroinvasividade e deficiências cognitivas relacionadas à COVID longa, e que o tratamento com CBD pode mitigar esses efeitos reduzindo a carga pró-inflamatória dessas vesículas. Para investigar isso, planejamos empregar um modelo in vitro translacional usando culturas primárias derivadas de biópsias do neuroepitélio olfatório. Vesículas extracelulares isoladas de células SH-SY5Y (células de neuroblastoma) infectadas com SARS-CoV-2 ou MOCK serão administradas a células enriquecidas em neurônios e glia derivadas de neuroepitélio olfatório humano por 24 horas. Após esse período, as células serão tratadas com CBD (0,3 e 3 µM) por 24 horas. Em seguida, serão conduzidos ensaios de incorporação de BrdU e MTT para viabilidade celular. Além disso, a senescência celular será avaliada usando técnicas de imunofluorescência. O número de células SA-¿-gal+ será quantificado para determinar a senescência celular. A normalidade da distribuição será avaliada usando o teste de Shapiro-Wilk. Os coeficientes de curtose e assimetria serão calculados para verificar se as variáveis ¿¿numéricas seguem uma distribuição normal. Os testes qui-quadrado ou exato de Fisher serão usados ¿¿para analisar variáveis ¿¿categóricas, enquanto os testes Mann-Whitney e ANOVA unidirecional serão empregados para comparar variáveis ¿¿numéricas. Valores de p menores que 0,05 serão considerados significativos, com um intervalo de confiança de 95%. Todos os dados serão apresentados como média ± erro padrão da média e analisados ¿¿usando R (Versão 4.4.1).