Vesículas extracelulares de fluido folicular e seus efeitos na maturação e qualidade do oócito bovino

• Processo: 24/08996-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Cláudia Lima Verde Leal
• Beneficiário: José Roberto Quirino de Oliveira
• Supervisor: Dimitrios Rizos
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria (INIA), Espanha
• Vinculado à bolsa: 23/12424-1 - Análise dos conteúdos de mRNAs e miRNAs relacionados ao metabolismo lipídico presentes nas vesículas extracelulares isoladas do soro fetal e do fluido folicular bovino utilizados em maturação in vitro, BP.IC
• Assunto(s): Exossomos Lipase Lipólise Metabolismo Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Exossomos | lipase | lipólise | metabolismo | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

A produção in vitro (PIV) de embriões bovinos é uma biotécnica bem estabelecida, porém, a qualidade dos embriões ainda está aquém do desejável; estes têm maior sensibilidade à criopreservação e maior acúmulo lipídico. O cultivo in vitro (CIV) de embriões com vesículas extracelulares (EVs) de fluido de oviduto (oEVs) ou com soro fetal bovino (SFB) depletado de EVs (SFBd), melhorou a qualidade e criotolerância. A suplementação sequencial do meio de CIV com oEVs seguido de EVs de fluido uterino (uEVs), resultou em embriões com menos lipídios e na modulação de transcritos e proteína de metabolismo lipídico. A adição de EVs de fluido folicular (ffEVs) na maturação in vitro (MIV) também melhorou a qualidade embrionária, mas efeitos sobre o metabolismo lipídico dos complexos cumulus-oócitos (CCOs) não foram determinados. Assim, o objetivo do presente estudo é de investigar o efeito das ffEVs sobre CCOs maturados in vitro com sua suplementação em relação ao metabolismo lipídico dos oócitos, bem como consequências sobre sua maturação e competência para o desenvolvimento. Para tanto CCOs serão submetidos à MIV com e sem adição de ffEVs e os oócitos avaliados em relação à taxa de maturação nucelar (% de oócitos em estágio de metáfase II), ao teor de lipídios e à atividade mitocondrial, mediante uso de sondas fluorescentes específicas. Expressão de genes de metabolismo lipídico em oócitos será avaliada por PCR (FASN, PPARGC1B, ACACA, FASN e HSL). Além disso, a competência para o desenvolvimento embrionário será avaliada por meio de fertilização e cultivo in vitro em relação à taxa de clivagem no dia 2 (D0=fertilização) e produção de blastocistos nos dias 6, 7 e 8 do desenvolvimento. Conhecimentos sobre o metabolismo lipídico de CCOs e do papel de ffEVs na MIV contribuirão para obter embriões de PIV de melhor qualidade.