Estudo do efeito dos peptídeos pQYP e QEP em interações proteicas e vias de sinalização no gânglio da raiz dorsal de camundongos.

• Processo: 24/20449-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Deborah Schechtman
• Beneficiário: Raphael Lobato de Siqueira Santos
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/06982-6 - Caracterização e desenvolvimento de novos moduladores das vias da TrkA e PKMzeta na dor inflamatória e crônica, AP.TEM
• Assunto(s): Dor Gânglios espinais Nociceptores Transdução de sinais Neurobiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dor | Gânglio da raiz dorsal | Hipersenssibilidade | Nociceptores | Peptídeos TAT-pQYP e QEP | sinalização celular | Neurobiologia

Resumo

O peptídeo TAT-pQYP foi desenhado para inibir a interação da PLC gama com a TrkA (Moraes et. al. 2022).Dados recentes de proteômica demonstram que o peptídeo TAT-pQYP se liga a outras proteínas com domínios SH2 além da PLCg. Como por exemplo a ubiquitina ligase Cbl.(projeto de iniciação cientifica da bolsista FAPESP Heloisa Ramos). Modificações do peptídeo TAT-pQYP como por exemplo uma substituição da tirosina fosforilada (pY) por um ácido glutâmico (E) peptídeo denominado de (QEP)também se liga ao domínio N-SH2 da PLC¿¿ mantendo a atividade de diminuição da hipernocicepção mecânica perante um estímulo inflamatório com fator de crescimento neural (NGF). O presente trabalho visa validar a interação do peptídeo pQYP ou QEP com outras proteínas utilizando gânglios da raiz dorsal (DRG) de camundongos. Além disso, visa-se verificar o efeito dos peptídeos (TAT-pQYP e TAT-QEP) em vias de sinalização no DRG de animais recém-nascidos e adultos perante a adição de NGF verificando se esses afetam o crescimento de neuritos. Visa-se estabelecer um modelo de entrega de peptídeo QEP por vírus retrogrado visando ter neurônios como os principais alvos e verificar o efeito desse vírus em vias dias sinalização in vitro e em DRG de animais tratados. Posteriormente visa-se estabelecer um sistema de entrega de vírus a modelos de dor crônica como ligação parcial do nervo ciático (PSNL) ou osteoartrite. Dessa forma saberemos o efeito do peptídeo pQYP e QEP em diferentes vias de sinalização perante o estimulo com NGF em animais com ou sem dor... a cisteínas pode resultar em fragmentos específicos e futuramente pequenas moléculas específicas para os diferentes domínios SH2 que ligam os peptídeos TAT-pQYP e QEP podendo elucidar mais especificamente o papel de proteínas envolvidas nessas ligações. Ensaios de binding auxiliarão na validação dessas interações e em culturas de gânglio da raiz dorsal (DRG) poderemos compreender melhor o significado da modulação das interações do TAT-pQYP e QEP com pequenas moléculas com diferentes domínios SH2.