Avaliação de Citocinas e Proteínas Sinalizadoras Envolvidas na Caquexia Cardíaca em Resposta aos Efeitos do Fator Walker em Cultura de Cardiomioblastos H9c2

• Processo: 25/14816-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Maria Cristina Cintra Gomes Marcondes
• Beneficiário: Igor Fernando dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/00608-0 - Aspectos moleculares, transcriptômico, proteômicos e metabolômicos da caquexia em modelo pré-clínico e na clínica, AP.TEM
• Assunto(s): Citocinas Leucina Nutrição e câncer
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: caquexia cardíaca | Células Cardiomioblastos H9c2 | citocinas inflamatórias | Fator Walker 256 | Leucina | proteínas sinalizadoras | Nutrição e Câncer

Resumo

A insuficiência cardíaca está comumente associada à sequela de infarto do miocárdio ou sobrecarga à pressão cardíaca, principalmente, decorrente de hipertensão arterial crônica. Contudo, as alterações observadas na estrutura e no metabolismo da musculatura cardíaca durante o desenvolvimento do câncer-caquexia ainda são pouco compreendidas. Resultados prévios demonstram intenso prejuízo à musculatura cardíaca em animais portadores do tumor de Walker 256, e minimização desses efeitos devido à suplementação nutricional com leucina.Um dos mecanismos propostos para essa condição é o desenvolvimento do desequilíbrio anabólico/catabólico, em que o anabolismo é reduzido devido ao aumento do catabolismo e às anormalidades nos sistemas neuro-hormonais, assim como à ativação de citocinas pró-inflamatórias. Torna-se, portanto, necessário estudos mais aprofundados quanto à relação entre o desenvolvimento da caquexia durante o câncer e os prejuízos à atividade miocárdica. Neste contexto, esse projeto tem como objetivo principal avaliar as vias de sinalização relacionadas à degradação e síntese proteica celular e estresse oxidativo em modelos in vivo e in vitro. Serão empregadas abordagens de proteômica por espectrometria de massas (LC-MS) e metabolômica por ressonância magnética nuclear (RMN), visando identificar alterações em perfis proteicos e metabólicos relacionados à caquexia cardíaca e à modulação promovida pela leucina. O principal foco do estudo é elucidar os prejuízos encontrados na musculatura cardíaca causados pelo nosso modelo experimental de caquexia - tumor de Walker 256, assim como possíveis biomarcadores, e os potenciais mecanismos protetivos decorrentes da suplementação com leucina. Objetivos:Considerando a degradação proteica característica do estado caquético-tumoral e o potencial modulatório da leucina, este estudo utilizará mioblastos H9c2 expostos ao Fator Walker (FW; mimetizando assim os efeitos do tumor de Walker), exossomos do líquido ascítico e soro de ratos caquéticos portadores de Tumor de Walker-256 para elucidar os mecanismos pelos quais a leucina modula os efeitos deletérios da caquexia cardíaca.Objetivos específicos:1. Avaliar potencial modulatório da suplementação com leucina sobre os efeitos gerados pelo FW e exposição ao soro de ratos caquéticos, em relação às vias de síntese proteica. Serão analisados os processos up-stream - as proteínas sinalizadoras Akt/P¿B, ERK/MAPK, STAT3 e STAT6, bem como os processos down-stream - JNK/SAPK, p70S6K, 4EBP1, das vias de sinalização mTOR e também as vias paralelas - como RAG e eiF2¿. 2. Investigar os processos de degradação proteica gerados por influência do FW e exposição ao soro de ratos caquéticos, sob a modulação da suplementação com leucina. Para isso, analisaremos as proteínas envolvidas nas três vias: ubiquitina-proteassomo (subunidades 20S, 19S e 11S, MuRF-1 e atrogina), lisossomal (catepsinas B e L) e dependente de cálcio (calpaina).3. Avaliar os processos de sinalização de apoptose mediada por citocinas como IL-4, IL-6, IL-15, IFN-¿ e TNF-¿, em especial as interleucinas IL-6 e TNF¿, quanto à sinalização através dos receptores e receptores solúveis. Esses resultados obtidos in vitro serão correlacionados aos dados de tecido cardíaco de animais portadores de tumor de Walker 256. (AU)