Caracterização dos substratos e do mecanismo de translocação do T4SS de Xanthomonas citri

• Processo: 25/22065-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2028
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Roberto Kopke Salinas
• Beneficiário: Luis Ricardo Pizzolato Cezar
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/10577-0 - Centro de Pesquisa em Biologia de Bactérias e Bacteriófagos (CEPID B3), AP.CEPID
• Assunto(s): Cristalografia Interação proteína-proteína Microbiologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | Interações Proteína-Proteína | Microbiologia Molecular | RMN de proteínas | Microbiologia molecular

Resumo

Sistemas de Secreção do Tipo IV (T4SSs) são formados por um conjunto de 11 subunidades VirB (VirB1 - VirB11) e por VirD4. Estas subunidades formam dois grandes sub-complexos: o complexo membrana externa (OMCC) e o complexo da membrana interna (IMC). O T4SS VirB/VirD4 do fitopatógeno Xanthomonas citri (T4SS-XAC) é especializado na secreção de toxinas que matam outras bactérias gram-negativas. Portanto, o T4SS-XAC está envolvido em competição entre bactérias. VirD4 é uma ATPase hexamérica associada à membrana e que recruta os substratos do T4SS para secreção. Os substratos do T4SS-XAC também são chamados de X-Tfes. Pouco se sabe sobre os mecanismos por trás do recrutamento e translocação dos X-Tfes. Mas todos eles contêm um domínio C-terminal pequeno (~ 120 aa) e altamente flexível, denominado "Xanthomonas VirD4 Interacting Protein Conserved Domain" ou XVIPCD. Os XVIPCDs reconhecem o domínio "All-Alpha Domain" (AAD) de VirD4 (VirD4-AAD). Com o objetivo de esclarecer o mecanismo de recrutamento e de translocação dos substratos do T44S-XAC, propomos investigar a estrutura e a dinâmica dos X-Tfes e sua interação com VirD4. Para tanto, utilizaremos uma combinação de métodos biofísicos como espectroscopia de RMN, cristalografia de raios X e calorimetria de titulação isotérmica (ITC). (AU)