| Processo: | 25/01284-0 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de outubro de 2025 |
| Data de Término da vigência: | 30 de setembro de 2028 |
| Área de conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica |
| Pesquisador responsável: | Antônio Pazin Filho |
| Beneficiário: | André Timoteo Sapalo |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Disfunção ventricular esquerda Ecocardiografia Cardiologia |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Azul de Evans | Disfunção ventricular esquerda | ecocardiograma | Edema miocárdico | glicocálix endotelial | Síndrome de Takotsubo | Cardiologia |
Resumo A síndrome de Takotsubo é uma cardiomiopatia rara que tem atraído cada vez mais atenção nos últimos anos. O presente estudo tem como objetivo investigar o edema miocárdico resultante da desnudação do glicocálix endotelial e sua contribuição para o desenvolvimento da disfunção ventricular esquerda na síndrome de Takotsubo em um modelo de rato. Ratos Wistar Hannover fêmeas, com 8 a 10 semanas de idade, serão usados para a indução da síndrome de Takotsubo. Isoprenalina (1,0 mg/kg) será infundida na veia caudal em um período de 15 minutos. As avaliações ecocardiográficas serão realizadas na linha de base, seguidas de avaliações em 6, 24 e 72 horas. Após o ecocardiograma inicial, os ratos receberão uma injeção intraperitoneal de azul de Evans (100 ¿g/kg). O ecocardiograma transtorácico será realizado em cada momento sob anestesia inalatória de isoflurano. Após cada avaliação ecocardiográfica, 10 animais serão eutanasiados em cada momento. Após a avaliação da função ventricular, 1,0 mL de sangue será coletado de oito dos 10 animais para análise de marcadores indicativos de lesão do glicocálix endotelial, especificamente os níveis das citocinas inflamatórias IL-6 e TNF-¿, quantificados por meio de um kit ELISA (Novus Biologicals, Biotechne, EUA). Para avaliar o extravasamento do azul de Evans, 1000 ¿L de formamida serão adicionados às amostras de tecido, que serão incubadas a 60°C por 24 horas. Após a incubação, 300 ¿L do sobrenadante serão usados para análise, e o restante será armazenado a -20°C. A concentração de azul de Evans será determinada pela medição da absorbância a 610 nm, com valores normalizados para o peso seco do tecido. Em dois animais de cada grupo, o coração será perfundido para preservação estrutural, e o tecido será preparado para posterior análise de microscopia eletrônica. A perfusão será realizada por aproximadamente 30 minutos, e pelo menos seis capilares selecionados aleatoriamente de cada animal serão analisados. A espessura do glicocálix e a distância extravascular máxima (definida como a distância entre a membrana basal capilar e o início do miócito) serão quantificadas usando o software ImageJ. Uma distância extravascular maior indicará um grau mais alto de extravasamento de fluido para o espaço intersticial. Além disso, em amostras de tecido designadas para microscopia convencional, o glicocálix endotelial será marcado com a lectina de Triticum vulgaris (trigo) conjugada com isotiocianato de fluoresceína (FITC). (AU) | |
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