Desvendando a Atividade da Microglia na Neurodegeneração e no Comprometimento Ventilatório em um Modelo Murino da Doença de Parkinson

• Processo: 25/27709-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 25 de maio de 2026
• Data de Término da vigência: 24 de novembro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Thiago dos Santos Moreira
• Beneficiário: Laís Maria Cardoso Cabral
• Supervisor: Jan Marino Ramirez
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Seattle Children'S Research Institute, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 24/06266-7 - A estimulação optogenética do nervo vago como uma estratégia de prevenção das alterações respiratórias encontradas no modelo da Doença de Parkinson induzido por 6- hidroxidopamina, BP.PD
• Assunto(s): Microglia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fiberphotometry | microglia | neurodegeneration | Optogenetics | Parkinsons Disease | Respiratory Deficits | Neurociências, fisiologia respiratória

Resumo

A doença de Parkinson (DP), o segundo distúrbio neurodegenerativo mais prevalente, é tradicionalmente associada a sintomas motores; entretanto, disfunções respiratórias representam uma das principais causas de mortalidade entre os pacientes. Em um modelo murino induzido por 6-hidroxidopamina (6-OHDA), nosso grupo demonstrou previamente uma redução na frequência respiratória associada à degeneração do núcleo retrotrapezoide (RTN) e do complexo pré-Bötzinger (preBötC), duas regiões do tronco encefálico envolvidas na geração do ritmo respiratório e na quimiorrecepção. Estresse oxidativo e neuroinflamação mediada por glia foram identificados como os principais contribuintes para essa degeneração.Neste estudo, investigaremos o papel da microglia na neurodegeneração do preBötC utilizando abordagens genéticas e de imagem avançadas. Camundongos Tmem119-Cre/Vglut2-FlpO e Tmem119-2A-CreERT2:Ai6 receberão injeções de adenovirus no preBötC: AAV-CAG-FLEX-jGCaMP8m-WPRE (para detecção de cálcio em microglia em células Tmem119-Cre), AAV-Ef1a-Coff/Fon-sRGECO (para detecção de cálcio neuronal em neurônios Vglut2-FlpO) e AAV-CAG-DIO-ChR2(H134R)-eYFP (para ativação optogenética da microglia).No primeiro grupo experimental, os camundongos serão submetidos a injeções bilaterais de 6-OHDA no corpo estriado (10 µg/0,5 µl), seguidas por fotometria de fibra e pletismografia de corpo inteiro para monitorar a atividade microglial e neuronal do preBötC, bem como a ventilação, ao longo de um período de 10 dias. No segundo grupo, a microglia será ativada por optogenética durante 10 dias consecutivos. Vinte e quatro horas após a estimulação final, a ventilação será avaliada por pletismografia, e imunofluorescência para Iba1 e hibridização in situ para Vglut2 serão utilizadas para identificar, respectivamente, microglia e neurônios do preBötC.Esses experimentos visam definir a sequência temporal da ativação microglial e o início da disfunção neuronal Vglut2-expressante no preBötC, bem como determinar se a ativação microglial isoladamente é suficiente para comprometer esses neurônios independentemente da degeneração induzida por 6-OHDA.