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Análise da expressão das proteínas metalotioneína e P53 em células de carcinoma epidermóide em meio de cultura suplementado com zinco

Processo: 07/03578-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de outubro de 2007
Vigência (Término): 30 de setembro de 2008
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Decio dos Santos Pinto Junior
Beneficiário:Paulo Vitor de Freitas Nuernberger
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Metalotioneína   Expressão de proteínas   Carcinoma de células escamosas   Zinco

Resumo

As metalotioneínas são proteínas ligantes que têm alta capacidade de unir-se e desunir-se ao zinco. Por essa razão a função de transporte, estocagem, manutenção da homeostasia e doação de zinco para proteínas zinco- dependentes pode ser atribuída a metalotioneína. Um estudo recente relata que a sua forma não ligada a metais (apo-metalotioneína) está presente em certas células neoplásicas. A apo-metalotioneína tem a capacidade de competir por zinco de genes como o P53, causando mutações nesse supressor de tumor. O zinco está envolvido em todos os níveis de transdução de sinais celulares como elemento estrutural ou como fator regulatório. A privação de zinco leva as células a entrarem em apoptose ao passo que concentrações aumentadas de zinco levam a atividade anti-oxidante. O presente projeto tem como finalidade estudar a influência do aumento da concentração de zinco em culturas de células de carcinoma epidermóide. Dessa maneira, 4 linhagens celulares (HaCat, HN30, HN31, HN6) serão utilizadas. Cada linhagem será dividida em 4 grupos: controle e com 0,1M de zinco em meio por 24, 48 e 72 horas. Será analisada a expressão da metalotioneína e do gene P53 através de Western-Blotting com anticorpos anti-metalotioneína e anti-P53 e a velocidade de crescimento celular através de quantificação na câmara de Neubauer e quantificação com MTS pelo método ELISA. (AU)