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Clonagem e expressão de um anticorpo (IgGk) anticelulas NK murinas em Saccharomyces cerevisiae

Processo: 98/14734-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de abril de 1999
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2000
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
Pesquisador responsável:Geraldo Aleixo da Silva Passos Júnior
Beneficiário:Roberta de Assis Maia
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Engenharia genética   Anticorpos   Clonagem   Células matadoras naturais   Saccharomyces cerevisiae

Resumo

O presente projeto situa-se no campo da engenharia genética de anticorpos visando a expressão de anticorpos monoclonais em sistemas heterólogos, neste caso a levedura S. cerevisial. Faremos a subclonagem de cDNAs de cadeia leve tipo kappa e de cadeia pesada IgE2a provenientes de um hidridoma murinho (PK136 anti-NK1.1) que secreta anticorpo monoclonal anti células NK (anti CD3), inserindo estes cDNAs no vetor de expressão de levedura pYES-2 (In Vitro Gen). Co-transformantes de levedura, contendo ambos os cDNAs, serão avaliados quanto a expressão da imunoglobulina. O anticorpo secretado pelas leveduras transgênicas serão avaliados quanto a funcionalidade de reconhecimento de células NK (CD3+) murinas. (AU)