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Clonagem ,e expressão, purificação e caracterização estrutural de duas proteínas relacionadas a patogenicidade de Xylella Fastidiosa

Processo: 06/52844-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de julho de 2006
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Anete Pereira de Souza
Beneficiário:Marcelo Augusto Szymanski de Toledo
Instituição-sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Xylella fastidiosa   Proteínas   Expressão gênica

Resumo

A Xylella fastidiosa é uma bactéria fitopatógena responsável pelo desenvolvimento de diversas doenças em culturas economicamente importantes para o homem. Dentre essas, encontra-se a CVC (clorose variegada de citrus), que afeta fortemente a cultura citrícola nacional. Até o presente momento não foi encontrado, um método eficaz de controle da doença sendo as medidas de combate até então usadas, apenas paliativos. Em 2000, foi realizado o Projeto Genoma da Xylella fastidiosa, o qual sequenciou o genoma da linhagem 9a5c. Assim a partir da genômica funcional é possível o desenvolvimento de métodos mais eficazes de controle da CVC através da análise estrutural e funcional de proteínas relacionadas à fitopatogenicidade da bactéria. Neste trabalho será realizada a parte inicial do estudo de proteínas relacionadas à patogenicidade da Xylella fastidiosa compreendendo na clonagem dos genes orf XF1532 (um regulador de transcrição em estresse oxidativo) e orf XF2135 (um catalisador procarioto da formação de dissulfetos), com posterior expressão e purificação das proteínas codificadas. Assim, com base na análise molecular realizada, tornam-se possíveis desenvolver métodos de controle do fitopatógeno que terão reflexos positivos na produção citrícola nacional. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
PEREIRA MACHADO, AGNES THIANE; BARRETO FONSECA, EMANUELLA MARIA; DOS REIS, MARCELO AUGUSTO; SARAIVA, ANTONIO MARCOS; DOS SANTOS, CLELTON APARECIDO; SZYMANSKI DE TOLEDO, MARCELO AUGUSTO; POLIKARPOV, IGOR; DE SOUZA, ANETE PEREIRA; APARICIO, RICARDO; IULEK, JORGE. Conformational variability of the stationary phase survival protein E from Xylella fastidiosa revealed by X-ray crystallography, small-angle X ray scattering studies, and normal mode analysis. PROTEINS-STRUCTURE FUNCTION AND BIOINFORMATICS, v. 85, n. 10, p. 1931-1943, OCT 2017. Citações Web of Science: 0.
FONSECA, EMANUELLA MARIA BARRETO; SCORSATO, VALERIA; DOS SANTOS, MARCELO LEITE; TOMAZINI, ATILIO; TADA, SUSELY FERRAZ SIQUEIRA; DOS SANTOS, CLELTON APARECIDO; DE TOLEDO, MARCELO AUGUSTO SZYMANSKI; DE SOUZA, ANETE PEREIRA; POLIKARPOV, IGOR; APARICIO, RICARDO. Crystal structure of a small heat-shock protein from Xylella fastidiosa reveals a distinct high-order structure. ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY COMMUNICATIONS, v. 73, n. 4, p. 222-227, APR 1 2017. Citações Web of Science: 1.
TOLEDO, M. A. S.; SCHNEIDER, D. R.; AZZONI, A. R.; FAVARO, M. T. P.; PELLOSO, A. C.; SANTOS, C. A.; SARAIVA, A. M.; SOUZA, A. P. Characterization of an oxidative stress response regulator, homologous to Escherichia coli OxyR, from the phytopathogen Xylella fastidiosa. Protein Expression and Purification, v. 75, n. 2, p. 204-210, FEB 2011. Citações Web of Science: 10.

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