Expressão e purificação dos domínios RRMs da proteína humana NSAP1 (hnRNP Q) para estudos estruturais e funcionais

• Processo: 03/12692-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2004
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Jörg Kobarg
• Beneficiário: Marcos Tadeu dos Santos
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Elementos estruturais de proteínas Purificação de proteínas Motivo de reconhecimento de RNA Interação proteína-proteína
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estrutura De Proteina | Hnrnpq | Metabolismo De Mrna

Resumo

NSAP1 é membro da família de proteínas hnRNPs ("heterogeneous nuclear ribonucleoproteins") e está também denominada hnRNP Q. O N-terminal do NSAP1 possui um domínio rico em aminoácidos ácidos (DA), seguido por três domínios RRMs ("RNA recognition motivs"). Na região C-terminal a NSAP1 ainda apresenta um domínio rico em repetições dos aminoácidos arginina e glicina ("RGG box"). Esta proteína está envolvida na regulação do "splicing" de mRNAs e no transporte dessas moléculas do núcleo para o citoplasma. Os domínios RRMs, presentes na proteína humana hnRNP Q (NSAP1) apresentam importante papel na interação dessa proteína com AUF1, proteína que atua no controle da expressão gênica, ligando-se a regiões 3' não traduzidas, ricas em AU. Esse projeto visa o a expressão e purificação dos domínios RRMs ("RNA recongnition motif"), presentes na proteína humana NSAP1 para estudos estruturais e funcionais. Na parte da análise estrutural técnicas espectroscópicas e de cristalografia serão usados. Experimentos funcionais in vitro como por exemplo "ensaios de gel shift" (EMSA) nos servirão para analisar as interações entre esses domínios e determinadas sondas de RNA. (AU)