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Polissacarídeos da biomassa do ascomiceto Verticillium lechani: extração, purificação e caracterização

Processo: 10/05567-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de agosto de 2010
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2011
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Maria de Lourdes Corradi Custodio da Silva
Beneficiário:Diego Tadeu Degli Exposti
Instituição-sede: Faculdade de Ciências e Tecnologia (FCT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Presidente Prudente. Presidente Prudente , SP, Brasil
Assunto(s):Cromatografia líquida de alta pressão   Polissacarídeos   Ressonância magnética nuclear

Resumo

Considerando que o micélio fúngico pode constituir uma importante fonte de compostos químicos, incluindo os polissacarídeos, a obtenção, o conhecimento da estrutura e atividade biológica de tais moléculas poderá contribuir para a utilização prática e racional da biomassa produzida a partir do cultivo do microrganismo. Esse trabalho terá como objetivo estudar a biomassa do Verticillium lechani, cultivado neste laboratório.Para obtenção dos polissacarídeos a biomassa será lavada com água destilada, exaustivamente, até que nenhum resíduo de açúcar livre seja detectado pelo método do fenol-ácido sulfúrico, garantindo a total remoção do EPS. A massa micelial será seca, fragmentada e submetida, consecutivamente, a três diferentes procedimentos extrativos: água fria (3x), água fervente (3x) e hidróxido de potássio a 2% (1x). Essas extrações separarão as biomoléculas em grupos, de acordo com suas solubilidades.A purificação dos extratos polissacarídeos será efetuada por processos repetidos de congelamento e descongelamento, precipitação por formação de complexo solúvel e insolúvel em Cu2+ (Precipitação com solução de Fehling) e cromatografia de filtração em gel, entre outros. As etapas de purificação serão monitoradas pelo perfil cromatográfico obtido por cromatografia de gel permeação e/ou exclusão estérica acoplada à detecção por índice de refração. Essa técnica também será utilizada para a determinação da massa molecular dos polissacarídeos, após estarem puros, por comparação a padrões de polissacarídeos, tais como dextrana. Tendo em vista que a caracterização estrutural de polissacarídeos é de grande importância para se entender os efeitos biológicos apresentados por esta classe de polímeros, a presente pesquisa visa, também, a elucidação estrutural dos polissacarídeos utilizando as técnicas convencionais em química de carboidratos tais como hidrólise, metilação e ressonância magnética nuclear de carbono treze e próton, uni- e bidimensionais.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CORRADI DA SILVA, MARIA L.; EXPOSTI, DIEGO T. D.; VASCONCELOS, ANA F. D.; ALEXANDRE, SAMARA M. A.; SILVEIRA, JOANA L. M.; DUCATTI, DIOGO R. B. Glucogalactan: A polysaccharide isolated from the cell-wall of Verticillium Lecanii. Carbohydrate Polymers, v. 98, n. 2, p. 1353-1359, NOV 6 2013. Citações Web of Science: 4.

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