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Padronização e aplicação de kits de solubilidade de proteínas para estudos estruturais por ressonância magnética nuclear

Processo: 08/09852-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de abril de 2009
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2010
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Ana Carolina de Mattos Zeri
Beneficiário:Camila Cristina Sanchez
Instituição-sede: Laboratório Nacional de Luz Síncrotron (LNLS). Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia, Inovações e Comunicações (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:98/14138-2 - Center for Structural Molecular Biotechnology, AP.CEPID
Assunto(s):Biologia estrutural   Proteínas   Ressonância magnética nuclear

Resumo

As proteínas "Protein Activator of PKR" (PACT) e "ds-RNA-dependent Protein Kinase" (PKR) fazem parte de uma família de proteínas que se ligam a RNA dupla fita (dsRNA). Ambas são expressas em baixos níveis em diversos tipos celulares, e estão envolvidas no processo de resposta imune diante de infecções virais. PACT possui 3 domínios: na região N-terminal estão presentes dois domínios de ligação a dupla fita de RNA, e na região C-terminal está presente o domínio de ativação da PKR. Este trabalho tem como objetivo maximizar a solubilidade e estabilidade dos domínios de PACT contribuindo, assim, com o projeto de resolução da estrutural por Ressonância Magnética Nuclear e estudos funcionais dos domínios de ligação a RNA dupla fita (dsRBD1/M1 e dsRBD2/M2) e do domínio de ativação de PKR (M3) da proteína humana PACT. Os protocolos e a metodologia desenvolvidas poderão ser generalizados para outras proteínas, com a padronização de "kits" de solubilização e estabilização de amostras para estudos estruturais por RMN.

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