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Estudo da regulação da atividade do promotor de THI1 em Arabidopsis thaliana e seu uso potencial em vetores de expressão de proteínas heterólogas

Processo: 01/07051-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2001
Vigência (Término): 30 de junho de 2003
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Marie-Anne van Sluys
Beneficiário:Denise Teixeira Ribeiro
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:98/11119-7 - Reparo de DNA lesado e conseqüências biológicas, AP.TEM
Assunto(s):Regulação da expressão gênica   Tiamina   Arabidopsis thaliana   Expressão de proteínas

Resumo

O gene THI1 de Arabidopsis thaliana é um gene envolvido na biossíntese de tiamina e no processo de reparo de DNA. Além disso, possui duplo sinal de direcionamento, para cloroplastos e mitocôndrias. Pretende-se neste projeto estudar a regulação deste gene a partir da análise da atividade do promotor, fusionado ao gene repórter GUS e introduzido em thaliana por transformação com Agrobacterium tumefasciens. A análise molecular do padrão de integração no genoma e a análise da expressão de GÚS poderão trazer informações sobre a distribuição espacial e temporal da atividade do promotor THI1, bem como a resposta a fatores ambientais, tais como presença e ausência de luz. Pretende-se também verificar a capacidade de ligação in vitro de fatores de transcrição relacionados à regulação por luz ao promotor de THI1. A atividade deste promotor será também avaliada no sistema heterólogo de cenoura, verificando seu potencial de uso na expressão de proteínas heterólogas. Temos como objetivo construir um cassete de expressão utilizando o promotor de THI1 com as sequências de direcionamento para organelas, para a produção de proteínas de interesse biomédico. (AU)