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Caracterização funcional de eIF5A e proteínas relacionadas em Saccharomyces cerevisiae

Processo: 08/50488-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de junho de 2008
Vigência (Término): 31 de outubro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Sandro Roberto Valentini
Beneficiário:Veridiana Soares Pereira Cano
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil

Resumo

Através de diferentes estudos elF5A foi envolvido com diversas etapas do metabolismo celular. As interações físicas e genéticas descritas em nosso laboratório favorecem a hipótese de que elF5A e proteínas relacionadas trabalhem juntas na célula para coordenar os processos de tradução e secreção, garantindo o correto brotamento durante a progressão do ciclo celular. No entanto, não está claro se elF5A é requerido para a síntese protéica global ou de um subgrupo de mRNAs ou, ainda, se sua atividade biológica é limitada a esta etapa do controle da expressão gênica. Uma vez que o entendimento de um sistema biológico requer a determinação da interação funcional entre suas partes constituintes, e a caracterização das interações entre as proteínas desse sistema pode contribuir para o entendimento da função específica de cada fator, este projeto visa a proposição de novos experimentos dirigidos por hipótese, com a finalidade de auxiliar na caracterização funcional de elF5A e suas enzimas modificadoras. Espera-se que através do estudo de elF5A e proteínas relacionadas (Ypt1, Pub1, Nab2, Nis1 e Sep7), seja possível estabelecer a inter-relação entre o processo de tradução e a via secretória ou o decaimento de mRNA. Os seguintes objetivos estão sendo propostos: i) Análise da síntese protéica nos mutantes condicionais de elFSA e Ypt1; ii) Análise do funcionamento da via secretória nos mutantes condicionais de elFSA e Ypt1; iii) Investigação da interação de elF5A com ribossomos associados as membranas; iv) Avaliação da interação de elF5A com membranas lipídicas; v) Análise do envolvimento de elF5A na tradução de um subgrupo específico de mensageiros por meio de análise proteômica de mutantes condicionais de elF5A; vi) Avaliação da interação física entre as proteínas Dys1, Nis1 e Sep7; vii) Identificação de fatores celulares que interagem fisicamente com Lia1 por meio do rastreamento de duplo-híbrido; viii) Análise da localização nuclear de Pub1; ix) Avaliação do efeito da seqüência ARE em relação a STE no decaimento de mRNA; x) Caracterização dos efeitos de Pub1 e Nab2 na tradução e organização dos P bodies; xi) Avaliação do efeito de Nab2 na regulação do mensageiro de MFA2 em resposta ao crescimento em diferentes fontes de carbono. (AU)