Estudo da regulacao da expressao do gene katg de caulobacter crescentus.

• Processo: 06/54326-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marilis Do Valle Marques
• Beneficiário: Valéria Cristina da Silva Italiani
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Estresse oxidativo Caulobacter crescentus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Catalase-Peroxidase | Caulobacter Crescentus | Estresse Oxidativo | Regulacao Genica

Resumo

O estresse oxidativo, causado por níveis aumentados do ânion superóxido (O2-), do peróxido de hidrogênio (H2O2), ou do radical hidroxila (OH), pode levar a danos em todos os componentes celulares. A enzima catalase-peroxidase, codificada pelo gene katG, é responsável pela detoxificação de peróxidos na maioria dos microrganismos, inclusive na bactéria de vida livre Caulobacter crescentus. Este trabalho pretende definir os mecanismos regulatórios da expressão do gene katG de C. crescentus já que evidências anteriores sugerem que neste organismo este gene apresenta regulação transcricional e pós-transcricional. Para isto, os níveis de transcrição e tradução de katG serão avaliados na linhagem selvagem e linhagens mutantes dos genes oxyR, fur, skgA e skgB, visto que estes genes foram previamente descritos como envolvidos no controle de katG. Neste trabalho, os mutantes nulos para os genes skgA e skgB serão obtidos por troca alélica, o início de transcrição de katG será determinado por ensaio de extensão de oligonucleotídeo e as regiões regulatórias deste gene serão identificadas através de mapeamento por deleção ou por mutagênese sítio-dirigido. Além disto, a estabilidade do mRNA de katG será avaliada, assim como, o acúmulo da proteína katG será determinado por ensaio de "Western Blot". (AU)