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Expressão e caracterização bioquímica do rLosac, um ativador de fator X recombinante das cerdas da lagarta Lonomia obliqua: mecanismos celulares envolvidos na atividade proliferativa e antiapoptótica

Processo: 07/51889-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2007
Vigência (Término): 31 de agosto de 2011
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Ana Marisa Chudzinski-Tavassi
Beneficiário:Miryam Paola Alvarez Flores
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Clonagem   Lonomia obliqua   Expressão gênica

Resumo

O Losac é o primeiro ativador de fator X (FX) purificado a partir das cerdas de um lepidóptero, ativando o FX da coagulação pela clivagem da ligação Arg52-IIe53 da cadeia pesada de forma similar ao RVV-X. O mecanismo de reconhecimento e clivagem do FX pelo Losac ainda é desconhecido, no entanto nossos estudos sugerem uma provável atividade do tipo serinoprotease. A seqüência do Losac e a análise de estrutura por modelagem molecular revelaram similaridade com moléculas de adesão celular conhecidas pelo seu papel chave no desenvolvimento do sistema neurológico tais como hemolinas de lepidópteros (47 a 76% de identidade), a neuroglian de D. melanogaster (34%) e L1-NCAM de humanos (26%). A função exata das hemolinas ainda é desconhecida. Provavelmente as propriedades adesivas das hemolinas estão associadas com o efeito do Losac observado em células endoteliais. Em 2006 publicamos um estudo demonstrando que o Losac é capaz de induzir várias respostas em HUVECs tais como proliferação, inibição da apoptose e liberação de moléculas como oxido nítrico e t-PA. Nossa perspectiva é dar continuidade a este estudo e determinar possíveis pontos de ligação na membrana celular, ativação de vias de sinalização intracelular, expressão de moléculas do mecanismo de apoptótico e da coagulação, domínios responsáveis pela atividade enzimática e celular e potencial terapêutico e biotecnológico. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ALVAREZ-FLORES, MIRYAM PAOLA; FURLIN, DANIEL; RAMOS, OSCAR H. P.; BALAN, ANDREA; KONNO, KATSUHIRO; CHUDZINSKI-TAVASSI, ANA MARISA. Losac, the First Hemolin that Exhibits Procogulant Activity through Selective Factor X Proteolytic Activation. Journal of Biological Chemistry, v. 286, n. 9, p. 6918-6928, MAR 4 2011. Citações Web of Science: 9.

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