Silenciamento de genes de inibidores de serinoproteases do barbeiro Triatoma infestans, avaliação bioquímica e morfológica dos insetos

• Processo: 05/52052-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Aparecida Sadae Tanaka
• Beneficiário: Ivan Torres Nicolau de Campos
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Coagulação Interferência de RNA Triatoma Serina proteases Inativação gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Barbeiro | Coagulacao | Expressao | Inibidores De Serinoproteases | Rna Interference | Triatoma Infestans

Resumo

Em projetos anteriores, identificamos, caracterizamos, clonamos e determinamos a estrutura tridimensional de inibidores de serinoproteases presentes no estômago do barbeiro T.infestans. Esses inibidores apresentam alta afinidade e especificidade a serinoproteases da coagulação sangüínea, sendo a infestina 1-2 um potente inibidor de trombina e a infestina 3-4 um sotente inibidor de fator Xlla. O silenciamento gênico por RNAi é uma tecnologia nova cujo uso vem crescendo rapidamente nos últimos anos. Esta técnica permite o estudo da função de genes através da eliminação do mRNA de interesse por um complexo chamado RISC presente nas células da maioria dos seres eucariotos. Neste projeto, pretendemos utilizar a tecnologia do RNAi para silenciar o gene da infestina e assim determinar a importância desses inibidores no processo de alimentação do T.infestans, bem como avaliar a viabilidade dos insetos no período pós-alimentação. Acredita-se que as infestinas apresentam um papel importante no armazenamento e digestão do sangue ingerido. Assim, analisaremos a viabilidade dos barbeiros, ovoposição e quantificaremos as atividades anticoagulantes do estômago. Pretendemos ainda, selecionar genes do carrapato Boophilus micropius para silenciarmos e analisarmos a viabilidade dos parasitas silenciados a fim de gerar dados para o desenvolvimento de uma vacina nacional. (AU)