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Estudos genômicos e proteômicos do trato digestivo do carrapato Rhipicephalus (Boophilus microplus) e determinação de antígenos imuno-responsivos ao antissoro de bovinos infestados

Processo: 06/55887-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2006
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Aparecida Sadae Tanaka
Beneficiário:Sergio Daishi Sasaki
Instituição-sede: Departamento de Bioquímica. Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:05/03514-9 - Estudos da função fisiológica e potencial biotecnológico de inibidores de proteases e anti-hemostáticos presentes em artrópodes hematófagos, AP.TEM
Assunto(s):Carrapatos   Vacinas   Boophilus microplus   Proteínas

Resumo

Neste projeto será realizada a construção de uma biblioteca de cDNA do trato digestivo do carrapato Boophilus micropius que terá os clones de fragmentos de cDNA seqüenciados, a análise comparativa com seqüências conhecidas de proteínas será realizada utilizado banco de dados eletrônicos por meio do programa BLAST do National Center for Biotechnology Information (NCBI), realizaremos a anotação das seqüências por meio do site do NCBI. Extratos do trato digestivo do carrapato B. micropius serão preparados e utilizados em análise por géis bidimensionais de proteína. Os "spots" protéicos serão selecionados, as proteínas serão extraídas do gel de poliacrilamida e terão suas massas moleculares e as seqüências das porções N-terminais determinadas, a análise dos dados obtidos será realizada utilizando o programa BLAST. Complementando os objetivos desse projeto, realizaremos a seleção de candidatos a antígenos identificados no carrapato B. micropius, utilizando o anti-soro de bovinos infestados e western-blottings dos géis bidimensionais do extrato de trato digestivo do carrapato. Realmente, realizaremos a imunização de bovinos utilizando como antígeno recombinante o inibidor de protease BmTI-6, avaliaremos o potencial protetor desse antígeno contra a infestação do B. micropius. (AU)