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Caracterizacao molecular de genes que participam da via calcineurina-crza em aspergillus fumigatus.

Processo: 09/50506-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de maio de 2009
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Gustavo Henrique Goldman
Beneficiário:Taisa Magnani Dinamarco
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:08/56254-2 - Functional analysis of the transcription factor XINR involved in regulation of transcription of cellulases - and hemicellulases-enconding genes in Aspergillus niger, AP.BIOEN.TEM
Assunto(s):Calcineurina   Aspergillus fumigatus

Resumo

O A. fumigatus é um fungo filamentoso que apresenta pouca incidência em indivíduos imunocompetentes. Entretanto, nas últimas décadas, esta incidência tem aumentado em pacientes com neutropenia disfuncional na doença granulomatosa crônica e AIDS. Muito pouco é conhecido sobre a regulação dos níveis de cálcio neste fungo e tem sido descrito que os íons cálcio têm importância crucial no controle de vários processos biológicos. A sinalização celular promovida pela fosfatase calcineurina, mediada por cálcio, altera o nível de expressão de diversos genes. A modulação da transcrição gênica pela calcineurina está relacionada à ativação de fatores de transcrição específicos que possuem motivos de ligação (docking site) à calcineurina, semelhantes à PxIxIT encontrados no NFAT e Crz1. Para a elucidação desta via de sinalização, foram realizadas análises computacionais que revelaram a presença de docking site para calcineurina em diferentes genes e fatores de transcrição. O presente projeto visa a caracterização molecular dos fatores de transcrição Rpn4 e Seb1 e do trocador Ca2+/H+ vacuolar em A. fumigatus, que apresentaram o motivo semelhante ao PxIxIT, o que permitirá a avaliação das alterações fenotípicas destes mutantes, bem como o entendimento da transdução de sinal mediada por cálcio. Além disto, serão determinadas e caracterizadas as proteínas que interagem com a calcineurina durante a sinalização celular. Para tanto, a abordagem adotada será a inserção de uma cauda S-tag na calcineurina, a qual permitirá sua posterior purificação, bem como das proteínas interagidas a ela, permitindo a identificação. (AU)

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