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Estudo do perfil de expressao genica de celulas da medula ossea humana diferenciada em osteoblastos.

Processo: 07/58015-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2008
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Karina Fittipaldi Bombonato Prado
Beneficiário:Glauce Crivelaro Do Nascimento
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos   Células-tronco   Terapia baseada em transplante de células e tecidos   Diferenciação celular   Osteoblastos

Resumo

As células tronco adultas são uma poderosa base celular para o tratamento de um espectro de doenças não tratadas por métodos tradicionais. A compreensão da natureza e qualidade de células-tronco específicas de cada tecido permitirá sua futura utilização na terapia celular. O objetivo deste trabalho é fazer uma análise da expressão gênica em larga escala (transcriptoma) de células-tronco da medula óssea humana (MO) e do potencial osteogênico durante a diferenciação em osteoblastos. Células-tronco adultas serão isoladas da MO, cultivadas em meio essencial mínimo (MEM 20%) até a subconfluência, plaqueadas na concentração de 2 x 104 células/poço (n-5) e divididas em dois grupos: controle (células em MEM 20%) e tratadas com meio total suplementado para diferenciação osteoblástica (MTS 10%). Após 7,14 e 21 dias de cultura, serão avaliadas viabilidade e proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP) e formação de nódulos mineralizados. Para análise da expressão gênica, o RNA total das células serão extraídas das células controle e diferenciadas. Serão feitas marcações das sondas de cDNA (amostras) com fluorocromos Cy3 e Cy5 e hibridização com microarrays contendo 4.500 seqüências representando a maioria dos tecidos humanos. A mudança significante de expressão gênica será analisada pelo programa SAM (Significance Analysis of Microarrays) - (p<0.05). (AU)