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Purificação e clonagem da redutase e luciferase de fungos bioluminescentes

Processo: 10/11578-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2010
Vigência (Término): 31 de agosto de 2013
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Radiologia e Fotobiologia
Pesquisador responsável:Vadim Viviani
Beneficiário:Anderson Garbuglio de Oliveira
Instituição-sede: Centro de Ciências e Tecnologias para a Sustentabilidade (CCTS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). Sorocaba , SP, Brasil
Assunto(s):Bioluminescência   Fungos   Luciferases

Resumo

A emissão de luz por diversos seres tem sido bastante estudada nas últimas décadas. Em vários sistemas bioluminescentes, as luciferases e demais proteínas acessórias adquiriram vastíssima aplicação biotecnológica e biomédica. Contudo, existem ainda sistemas bioluminescentes pouco estudados, como o sistema de fungos, cuja purificação e caracterização das enzimas relacionadas à emissão de luz poderiam contribuir para estudos mecanísticos, evolutivos e o desenvolvimento de novas ferramentas analíticas.Apenas recentemente foi comprovado o envolvimento de uma luciferase no processo de emissão de luz em fungos. Em 2009, Oliveira e Stevani corroboraram a hipótese enzimática, desenvolvida durante a década de 1960, por Airth e Foerster. Segundo os autores, de maneira semelhante ao que ocorre em bactérias, uma a redutase dependente de NAD(P)H e uma luciferase estão envolvidas na luminescência de fungos, porém a natureza dessas enzimas permanece indeterminada.Considerando a crescente demanda por métodos de marcação celular, e de biossensores, seria intereressante caracterizar as enzimas fúngicas relacionadas à bioluminescência e localizar os genes responsáveis pela expressão protéica. O presente projeto tem como objetivo purificar, caracterizar, clonar e expressar as enzimas redutase e luciferase envolvidas na bioluminescência fúngica, utilizando o fungo "Pleurotus" gardneri como fonte de material.

Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
KOTLOBAY, ALEXEY A.; SARKISYAN, KAREN S.; MOKRUSHINA, YULIANA A.; MARCET-HOUBEN, MARINA; SEREBROVSKAYA, EKATERINA O.; MARKINA, NADEZHDA M.; SOMERMEYER, LOUISA GONZALEZ; GOROKHOVATSKY, ANDREY Y.; VVEDENSKY, ANDREY; PURTOV, KONSTANTIN V.; PETUSHKOV, VALENTIN N.; RODIONOVA, NATALJA S.; CHEPURNYH, TATIANA V.; FAKHRANUROVA, LILIIA I.; GUGLYA, ELENA B.; ZIGANSHIN, RUSTAM; TSARKOVA, ALEKSANDRA S.; KASKOVA, ZINAIDA M.; SHENDER, VICTORIA; ABAKUMOV, MAXIM; ABAKUMOVA, TATIANA O.; POVOLOTSKAYA, INNA S.; EROSHKIN, FEDOR M.; ZARAISKY, ANDREY G.; MISHIN, ALEXANDER S.; DOLGOV, SERGEY V.; MITIOUCHKINA, TATIANA Y.; KOPANTZEV, EUGENE P.; WALDENMAIER, HANS E.; OLIVEIRA, ANDERSON G.; OBA, YUICHI; BARSOVA, EKATERINA; BOGDANOVA, EKATERINA A.; GABALDON, TONI; STEVANI, CASSIUS V.; LUKYANOV, SERGEY; SMIRNOV, IVAN V.; GITELSON, JOSEF I.; KONDRASHOV, FYODOR A.; YAMPOLSKY, ILIA V. Genetically encodable bioluminescent system from fungi. PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, v. 115, n. 50, p. 12728-12732, DEC 11 2018. Citações Web of Science: 4.
OBA, YUICHI; SUZUKI, YOSHIKI; MARTINS, GABRIEL N. R.; CARVALHO, RODRIGO P.; PEREIRA, TATIANA A.; WALDENMAIER, HANS E.; KANIE, SHUSEI; NAITO, MASASHI; OLIVEIRA, ANDERSON G.; DORR, FELIPE A.; PINTO, ERNANI; YAMPOLSKY, ILIA V.; STEVANI, CASSIUS V. Identification of hispidin as a bioluminescent active compound and its recycling biosynthesis in the luminous fungal fruiting body. PHOTOCHEMICAL & PHOTOBIOLOGICAL SCIENCES, v. 16, n. 9, p. 1435-1440, SEP 1 2017. Citações Web of Science: 6.
KASKOVA, ZINAIDA M.; DORR, FELIPE A.; PETUSHKOV, VALENTIN N.; PURTOV, KONSTANTIN V.; TSARKOVA, ALEKSANDRA S.; RODIONOVA, NATALJA S.; MINEEV, KONSTANTIN S.; GUGLYA, ELENA B.; KOTLOBAY, ALEXEY; BALEEVA, NADEZHDA S.; BARANOV, MIKHAIL S.; ARSENIEV, ALEXANDER S.; GITELSON, JOSEF I.; LUKYANOV, SERGEY; SUZUKI, YOSHIKI; KANIE, SHUSEI; PINTO, ERNANI; DI MASCIO, PAOLO; WALDENMAIER, HANS E.; PEREIRA, TATIANA A.; CARVALHO, RODRIGO P.; OLIVEIRA, ANDERSON G.; OBA, YUICHI; BASTOS, ERICK L.; STEVANI, CASSIUS V.; YAMPOLSKY, ILIA V. Mechanism and color modulation of fungal bioluminescence. SCIENCE ADVANCES, v. 3, n. 4 APR 2017. Citações Web of Science: 19.
OLIVEIRA, ANDERSON G.; STEVANI, CASSIUS V.; WALDENMAIER, HANS E.; VIVIANI, VADIM; EMERSON, JILLIAN M.; LOROS, JENNIFER J.; DUNLAP, JAY C. Circadian Control Sheds Light on Fungal Bioluminescence. Current Biology, v. 25, n. 7, p. 964-968, MAR 30 2015. Citações Web of Science: 25.

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