Caracterizacao cinetica da enzima na, k-atpase e determinacao da estrutura do tecido branquial do siri callinectes ornatus ordway, 1863 (crustacea, portunidae), aclimatado a salinidade de 21%.

• Processo: 07/59038-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de abril de 2008
• Vigência (Término): 31 de julho de 2009
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Francisco de Assis Leone
• Beneficiário: Romulo Alvarez de Paiva
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Microscopia de fluorescência Ultraestrutura
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Branquia | Callinectes Ornatus | Crustaceo | Microscopia De Fluorescencia | Na K-Atpase | Ultraestrutura

Resumo

Este projeto de IC é uma continuidade da linha de pesquisa apoiada pela FAPESP, intitulada Na+/K+-ATPase da fração microsomal de tecido branquial como marcador molecular da adaptação dos crustáceos a ambientes de diferentes salinidades: caracterização cinética da enzima de Callinectes ornatus aclimatado a salinidade de 21%o", cujo objetivo é o estudo sistemático das propriedades estruturais e cinéticas da Na+/K+-ATPase do tecido branquial de Callinectes ornatus aclimatado a salinidade de 21%o para posterior comparação com as já obtidas de animais capturados em seu habitat natural . A fim de se obter informações que permitam contribuir para uma melhor compreensão das adaptações fisiológicas e bioquímicas associadas à mudança de salinidade serão realizados os seguintes estudos: 1) preparação da Na+/K+-ATPase do tecido branquial de animais aclimatados a salinidade de 21 %o (habitat natural). 2) caracterização cinética da atividade da enzima em relação aos ligantes ATP, PNPP, sódio, potássio, magnésio e amônio, bem como os inibidores vanadato e ouabaina. 3) determinação da abundância relativa da enzima através de imunoblotting. 4) determinação da ultraestrutura da brânquia (microscopia óptica, eletrônica e de fuorescência). 5) caracterização da fosfoenzima em relação ao diferentes ligantes. 6) efeito das poliaminas na atividade da enzima. 7) determinação da osmolaridade e concentração de íons da hemolinfa. Espera-se que esses estudos contribuam tanto para o avanço da compreensão dos mecanismos envolvidos na conquista do ambiente dulcícola/terrestre pelos crustáceos decápodes, bem como o estabelecimento de um modelo do(s) mecanismo(s) de regulação osmótica que atua(m) nos crustáceos além do conhecimento acerca das Na+/K+-ATPases dos crustáceos, ainda muito pouco estudadas. (AU)