| Processo: | 10/06395-9 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de junho de 2010 |
| Data de Término da vigência: | 30 de novembro de 2011 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia |
| Pesquisador responsável: | Francisco de Assis Leone |
| Beneficiário: | Daniela Pereira Garçon |
| Instituição Sede: | Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Osmorregulação Elementos estruturais de proteínas Purificação de proteínas |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Callinectes danae | Excreção de amônio | expressão | Fxyd2 | K)-ATPase | (Na | Osmorregulação | (Na,K)-ATPase |
Resumo Este projeto de Pós-Doutorado é uma continuidade de nossa linha de pesquisa, que vem sendo apoiada pela FAPESP, e cujo objetivo é o estudo sistemático das propriedades estruturais e cinéticas da (Na,K)-ATPase do tecido branquial de diferentes espécies de caranguejos e camarões afim de se tentar estabelecer um modelo para adaptação dos crustáceos a ambientes de diferentes salinidades. A manutenção da osmolalidade da hemolinfa dos crustáceos é atribuída à (Na,K)-ATPase e este mecanismo de adaptação sugere que as respostas dos crustáceos devem envolver uma rápida ativação do transporte de íons que deve ser primária a qualquer outra resposta fisiológica deste animal. No presente projeto pretende-se investigar a sinalização celular vinculada à regulação da (Na,K)-ATPase bem como suas conseqüências diretas na captação de NaCl através das brânquias durante a aclimatação a ambientes hiposalinos e a ambientes marinhos. Para isso serão realizados os seguintes estudos: 1) relacionar o processo de aclimatação do C. danae com a expressão diferencial do FXYD2 (subunidade g); 2) estudar o efeito do FXYD2 fosforilado por PKA na atividade catalítica da (Na,K)-ATPase de C. danae; 3) clonagem e o sequenciamento do FXYD2 presente na preparação da (Na,K)-ATPase branquial de C. danae; 4) estudar o efeito das poliaminas em diferentes meios salinos, relacionando-os as proteínas cinases que são ativadas durante o estresse osmótico, utilizando cultura de células das brânquias de C. danae; 5) elaboração de um protocolo de purificação da (Na,K)-ATPase de C. danae, afim de se obter uma fração enriquecida da enzima visando a identificação de seu padrão de clivagem, e posteriormente a conformação ligada ao sítio de ligação do NH+4; 6) identificar o papel que outros reguladores endógenos (dopamina, octopamina) teriam na (Na,K)-ATPase das células branquiais cultivadas; 7) estabelecer a seqüência de aminoácidos da (Na,K)-ATPase, a fim de identificar os possíveis resíduos envolvidos na ligação dos cátions; 8) relacionar o FXYD2 com as proteínas cinases estimuladas por poliaminas e a sua ação final diante da atividade da (Na,K)-ATPase em diferentes meios salinos, utilizando-se cultura de células das brânquias de C. danae. | |
| Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre a bolsa: | |
| Mais itensMenos itens | |
| TITULO | |
| Matéria(s) publicada(s) em Outras Mídias ( ): | |
| Mais itensMenos itens | |
| VEICULO: TITULO (DATA) | |
| VEICULO: TITULO (DATA) | |