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Clonagem e expressão de crotamina - uma miotoxina do veneno de cascabel (Crotalus durissus terrificus)

Processo: 00/00237-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de julho de 2000
Vigência (Término): 30 de junho de 2001
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Tetsuo Yamane
Beneficiário:Juliana Penteado Rodrigues
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Crotamina   Crotalus durissus   Venenos

Resumo

A crotamina (CR) recombinante tem sido expressada, por nosso grupo, em E.coli, na forma de proteína de fusão (6xHIS- CR). Dado que a toxina possui 3 pontes dissulfeto, é essencial que seja testada a expressão em células eucarióticas. Nesse sentido, a seqüência nucleotídica da CR será ligada em fase de leitura com o promotor forte da gal do shuttle vector pYES (Invitrogen). A construção será então, usada para transformar células de S.cerevisiae. A produção, refolding e atividade biológica da CR recombinante nos dois sistemas de expressão serão comparadas. (AU)