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Clonagem, expressao e purificacao da enzima diidroorotato desidrogenase de xylella fastidiosa-linhagem temecula.

Processo: 04/16059-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de maio de 2005
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2006
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Maria Cristina Nonato
Beneficiário:Valeria Carvalho Pereira Dias
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:01/14583-0 - Desenho racional de inibidores contra DHODH (diidroorotato desidrogenase): aplicações no tratamento da Doença de Chagas e no combate à praga do amarelinho, AP.JP
Assunto(s):Clonagem   Doença de Pierce   Xylella fastidiosa

Resumo

O presente projeto visa a clonagem, expressão e purificação da enzima diidroorotato desidrogenase da bactéria Xylella fastidiosa-linhagem temécula Xylella fastidiosa é uma bactéria transmitida por um inseto hospedeiro e pode bloquear os vasos que transportam água e sais pela planta. A bactéria tem diversas linhagens, classificadas como parte da mesma espécie, que atingem cultivos, específicos, como amora, laranja, café e amêndoa. A linhagem temécula é responsável pela doença de Pierce que ataca plantações de uva na região da Califórnia. A enzima diidroorotato desidrogenase (DHODH) pertence à via de síntese de novo de nucleotídeos de pirimidinas, catalisando a oxidação da molécula L-diidroorotato em orotato. Nucleotídeos de pirimidina são essenciais para os ácidos nucléicos, metabolismo, em mecanismos de ativação de açúcar em glicosilação pós-traducional de proteínas e lipídeos e para a biosíntese de fosfolipídeos. Esforços recentes no desenvolvimento de drogas "antipirimidinas" com atividade anti-inflamatória, imunosupressora, antiproliferativa, antiparasitária e antibacteriana tem focado a enzima DHODH como alvo promissor. Dentro deste contexto, a expressão e purificação da enzima DHODH constituem o primeiro passo para a caracterização da enzima. O isolamento da enzima permitirá que em futuros estudos bioquímicos e biofísicos, valiosas informações possam ser obtidas para o desenvolvimento de inibidores específicos, como uma importante ferramenta no combate à doença de Pierce. (AU)