Análise proteômica dos grânulos de neuromelanina no envelhecimento normal e na Doença de Parkinson

• Processo: 10/06521-4
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2010
• Vigência (Término): 31 de julho de 2013
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Lea Tenenholz Grinberg
• Beneficiário: Renata Elaine Paraizo Leite
• Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
• Assunto(s): Envelhecimento Proteômica Patologia Neurociências Doença de Parkinson

Resumo

Embora muitas regiões do encéfalo exibam os sinais neuropatológicos da doença de Parkinson (DP), a perda de células contendo neuromelanina na substância negra representa um critério diagnóstico cardinal para a DP. Atualmente muitas questões permanecem sem resposta a respeito da neuromelanina, mas sua presença como uma característica básica de um grupo de células vulneráveis sugere um papel deste pigmento na fisiopatologia da DP. Assim, visando entender a estrutura e função da neuromelanina e identificar proteínas que estão alteradas na DP, propomos um projeto colaborativo no qual serão utilizadas amostras de substância negra provenientes do Banco de Encéfalos Humanos do Grupo de Estudos em Envelhecimento Cerebral (BEHGEEC) da Faculdade de Medicina da USP. Serão analisados 50 casos englobando portadores de DP e controle, de ambos os gêneros, com idade igual ou superior a 50 anos. Os grânulos de neuromelanina serão isolados no Brasil utilizando fracionamento subcelular. A qualidade dos grânulos isolados e a preservação das características ultra-estruturais serão monitoradas por microscopia eletrônica. Os procedimentos de identificação das proteínas serão realizados no Centro de Proteômica Médica da Universidade de Bochum na Alemanha e incluirão 1D SDS-PAGE, Western blot e espectometria de massa. Nenhum dado identificador do sujeito da amostra será enviado ao exterior. Ao final do trabalho serão produzidos anticorpos para detecção das proteínas alteradas. Estes anticorpos serão validados no tecido por meio de imunoistoquímica, no Brasil. Somando-se ao fato de não existirem modelos animais adequados que reproduzam toda a fisiopatologia da DP, a neuromelanina é ausente no cérebro de muitas espécies não humanas, o que torna mandatório o uso de tecido humano neste trabalho. Além disso, a neuroproteômica é uma técnica incipiente no Brasil e ainda muito cara, o que faz desta colaboração uma oportunidade única para o entendimento da estrutura e função da neuromelanina e identificação de proteínas que estão alteradas na DP.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

RODRIGUEZ, ROBERTA DIEHL; SUEMOTO, CLAUDIA KIMIE; MOLINA, MARIANA; NASCIMENTO, CAMILA FERNANDES; LEITE, RENATA ELAINE PARAIZO; DE LUCENA FERRETTI-REBUSTINI, RENATA ELOAH; FARFEL, JOSE MARCELO; HEINSEN, HELMUT; NITRINI, RICARDO; UEDA, KENJI; PASQUALUCCI, CARLOS AUGUSTO; JACOB-FILHO, WILSON; YAFFE, KRISTINE; GRINBERG, LEA TENENHOLZ. d Argyrophilic Grain Disease: Demographics, Clinical, and Neuropathological Features From a Large Autopsy Study. JOURNAL OF NEUROPATHOLOGY AND EXPERIMENTAL NEUROLOGY, v. 75, n. 7, p. 628-635, JUL 2016. Citações Web of Science: 8.

NASCIMENTO, CAMILA; SUEMOTO, CLAUDIA K.; RODRIGUEZ, ROBERTA D.; DI LORENZO ALHO, ANA TEREZA; LEITE, RENATA P.; FARFEL, JOSE MARCELO; GONCALVES PASQUALUCCI, CARLOS AUGUSTO; JACOB-FILHO, WILSON; GRINBERG, LEA T. Higher Prevalence of TDP-43 Proteinopathy in Cognitively Normal Asians: A Clinicopathological Study on a Multiethnic Sample. Brain Pathology, v. 26, n. 2, p. 177-185, MAR 2016. Citações Web of Science: 10.