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Obtenção de DNAs recombinantes para expressão de regiões específicas da proteína SET em linhagens celulares humanas

Processo: 08/01509-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2008
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
Pesquisador responsável:Andréia Machado Leopoldino
Beneficiário:Daiane Errera da Silva
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:06/06334-4 - Estudo molecular e funcional da oncoproteína SET, AP.JP
Assunto(s):Expressão de proteínas   Biomarcadores tumorais   Proteínas   Neoplasias   Mutação

Resumo

A proteína SET possui expressão alterada em tumores de cavidade oral o que sugere seu papel como oncogene nesta tumorigênese. A proposta de iniciação científica está vinculada ao Projeto de Jovem Pesquisador aprovado pela FAPESP (2006/06334-4). Sendo assim o objetivo deste trabalho de IC é a obtenção de DNAs recombinantes contendo regiões específicas da proteína SET para expressão em linhagens celulares humanas e estudo de sua atividade numa via de sinalização específica. Para obtenção das construções de DNA contendo as regiões de interesse da SET utilizaremos a estratégia de amplificação do cDNA correspondente por PCR, digestão com enzimas de restrição de DNA e clonagem em vetor para expressão em eucariotos. Os insertos serão confirmados por PCR e seqüenciamento automático de DNA. Esta proposta permitirá o treinamento do aluno de IC e auxiliará no desenvolvimento do projeto JP. Após obtenção dos DNAs recombinantes daremos seguimento aos estudos in vitro começando pela análise da região da proteína expressa usando Western blotting, que constituirá outra etapa. (AU)

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