Detecção da expressão de receptores purinérgicos do subtipo P2X durante a diferenciação neuronal de células P19 utilizando técnicas de hibridização in situ

• Processo: 03/06681-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Alexander Henning Ulrich
• Beneficiário: Rogério Lauria da Silva
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 01/08827-4 - Modulação artificial da diferenciação neuronal e função de receptores por oligonucleotídeos sintéticos atuantes aos níveis gênico e protéico, AP.JP
• Assunto(s): Receptores purinérgicos Receptores purinérgicos P2X Hibridização in situ DNA complementar Digoxigenina Diferenciação neuronal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celulas P19 | Diferenciacao Neurnonal | Hibridizacao In Situ | Receptores Purinergicos

Resumo

A partir da extração de RNA de células P19 criadas em cultura, obteremos o cDNA correspondente à expressão dos receptores P2X, por meio de técnicas de biologia molecular (RT-PCR e PCR). Esse DNA será então clonado, sequenciado e transfectado em bactérias competentes. Esse inserto será posteriormente extraído e a partir dele serão sintetizadas sondas de RNA marcadas com digoxinenina, com as quais serão feitos os processos de hibridização in situ para a detecção da expressão dos receptores P2X. (AU)