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Melanopsinas em vertebrados não mamíferos: função e transdução do sinal luminoso

Processo: 09/53533-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2010
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2013
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Comparada
Pesquisador responsável:Ana Maria de Lauro Castrucci
Beneficiário:Leonardo Henrique Ribeiro Graciani de Lima
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:06/03381-1 - Fisiologia comparativa de relógios periféricos: genes de relógio (CLOCK, PER1, PER2, CRY1 e BMAL 1) e sua modulação por luz e hormônios em peixes, anfíbios e mamíferos, AP.TEM
Bolsa(s) vinculada(s):11/23930-8 - Melanopsina em vertebrados não mamíferos: função e transdução do sinal luminoso, BE.EP.PD
Assunto(s):Interferência de RNA   GMP cíclico   Óxido nítrico   Cálcio

Resumo

O presente projeto tem como objetivo investigar a funcionalidade das duas melanopsinas (OPN4x e OPN4m) encontradas nos vertebrados não mamíferos e também comparar a via de transdução de sinal intracelular destas em resposta a estímulo luminoso. Para que esse objetivo seja alcançado propomos que esta análise seja feita em culturas de células de vertebrados não mamíferos: cultura de células da retina de embriões de galinha; melanóforos do anfíbio Xenopus leavis; linhagem de células embrionárias ZEM-2S do teleósteo Danio rerio. Para avaliar a resposta de cada melanopsina, pretendemos silenciar a expressão gênica da outra nestes modelos celulares por meio de RNA de interferência. Acompanhar as respostas a estímulo luminoso com microscopia confocal, e identificar se as vias de transdução de sinal descritas na literatura para OPN4m em mamífero funcionam da mesma forma para as duas melanopsinas em vertebrados não mamíferos e portanto são redundantes nestes organismos, ou se diferenças entre estas podem significar a perda de um mecanismo de sincronização em mamíferos. (AU)