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Síntese e um tensoativo de afinidade visando a purificação da glicose-6-fosfato desidrogenase em sistemas micelares de duas fases aquosas

Processo: 07/52477-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de setembro de 2007
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2008
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
Pesquisador responsável:Adalberto Pessoa Junior
Beneficiário:Gabriel Lorensini de Oliveira
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Extração líquido-líquido   Purificação de proteínas   Sistema de duas fases aquosas   Processamento downstream   Engenharia bioquímica

Resumo

O presente projeto tem como objetivo o desenvolvimento do tensoativo de afinidade visando à purificação da enzima glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD), utilizando a tecnologia de extração liquido-líquido por Sistemas Micelares de Duas Fases Aquosas (SMDFA). Esse sistema proporciona um ambiente favorável às biomoléculas, permitindo o controle e otimização da sua purificação conforme as condições empregadas. Será estudada a síntese do tensoativo de afinidade, através da ligação covalente do tensoativo não-iônico Triton X-114 ao ligante de afinidade cibacron blue. Serão realizadas também as análises do produto de síntese, por espectrometria de absorção na região do infravermelho (IV) e espectrometria de ressonância magnética nuclear (RMN). O produto obtido na síntese será estudado para verificar seu efeito na partição da G6PD em diferentes concentrações e temperaturas em SMDFA. Os resultados obtidos experimentalmente serão analisados em termos de coeficiente de partição da biomolécula (KG6PD), bem como o balanço de atividade da enzima estudada (BAG6PD), entre outros, com o intuito de otimizar a purificação da biomolécula de interesse através dos Sistemas Micelares de Duas Fases Aquosas. (AU)