Respostas celulares a lesões no genoma

• Processo: 09/52120-4
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de setembro de 2009
• Vigência (Término): 31 de agosto de 2010
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Mutagênese
• Pesquisador responsável: Carlos Frederico Martins Menck
• Beneficiário: Luís Guilherme Puttini Polo
• Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Dano ao DNA Reparo do DNA Citotoxicidade Cisplatino

Resumo

A resposta celular a lesões no DNA compreende grande variedade de diferentes processos biológicos como a parada de ciclo celular, tolerância à lesão, reparo da lesão ou indução de apoptose. Linhagens celulares mutantes em genes que codificam para proteínas de reparo apresentam maior sensibilidade aos agentes genotóxicos além de que alterações nas vias de reparo são importantes na quimiorresistência a agentes quimioterápicos. O objetivo do projeto é avaliar a participação de diferentes vias de reparo na resposta aos danos causados pelo agente quimioterápico cisplatina. Para isso as linhagens celulares MRC5 (proficiente em reparo por excisão de nucleotídeos, NER), XP12RO (deficientes no reparo por NER, no gene XPA) e XP12RO complementada (proficiente em NER) serão expostas à cisplatina e a citotoxicidade será avaliada determinando-se a capacidade clonogênica e a porcentagem de células hipodiplóides por citometria de fluxo. Em seguida, siRNA contra o gene da proteína DNA-PK (quinase dependente de DNA, a qual participa no reparo de extremidades não homólogas, NHEJ) será usado para explorar o envolvimento NHEJ na sensibilidade à cisplatina (AU)