Estudo de respostas celulares induzidas por irradiacao ultravioleta atraves da tranducao de genes de reparo de dna e silenciamento genico de dna polimerase de sintese translesao.

• Processo: 06/56750-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Carlos Frederico Martins Menck
• Beneficiário: Keronninn Moreno de Lima Bessa
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/13255-5 - Genes de reparo de DNA: análise funcional e evolução, AP.TEM
• Assunto(s): Reparo do DNA RNA interferente pequeno
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fotoliases | Luz Ultravioleta | Polimerase Eta | Reparo De Dna | Sirna | Vetores Adenovirais

Resumo

A irradiação ultravioleta (UV) gera lesões na molécula de DNA, sendo as mais freqüentes os dímeros de pirimidina ciclobutano (CPDs) e os fotoprodutos (6-4)-pirimidina-pírimidona (6-4PPs). Estas lesões podem ser reparadas do genoma através de dois processos, sendo um deles o reparo por fotorreativação, desempenhado por enzimas fotolíases, que removem esses fotoprodutos convertendo energia luminosa. O outro processo responsável pela remoção destas lesões é o reparo por excisão de nucleotídeos (NER), subdividido em reparo acoplado à transcrição ("transcription-coupled repair" -TCR) e reparo global do genoma ("global genomic repair" - GGR). Construímos vetores adenovirais carregando fotoliases para investigar o papel de lesões CPDs e 6-4PPs na apoptose induzida por luz UV em células humanas proficientes e deficientes em NER. Os resultados obtidos nesses ensaios revelaram que ambas as lesões estão igualmente envolvidas na morte celular após irradiação UV em linhagens deficientes em NER, mas os CPDs são os principais sinalizadores de morte em células proficientes no reparo de DNA Assim, propõe-se, como projeto de pós-doutorado, o emprego desses vetores na investigação do papel de cada uma dessas lesões no bloqueio de processos celulares fundamentais, como replicação e transcrição. Além disso, é nosso interesse utilizar siRNA para knock down da polimerase eta (xpv) no intuito de estudar os efeitos da inibição de mecanismos de TLS de lesões CPDs em células deficientes no reparo destas. (AU)