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Emprego de um vetor adenovírus recombinante contendo o gene fotoliase-EGFP no estudo de sinalização de apoptose por luz UV

Processo: 03/04532-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2003
Vigência (Término): 31 de agosto de 2004
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Carlos Frederico Martins Menck
Beneficiário:Vanessa Chiganças
Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:98/11119-7 - Reparo de DNA lesado e conseqüências biológicas, AP.TEM
Assunto(s):Apoptose   Adenovirus

Resumo

Os dímeros de pirimidina cidobulano (CPDs) são as principais lesões geradas no DNA por irradiação UV. interferindo com diferentes processos na célula, como replicação, transcrição, podendo também ocasionar a geração de mutações na seqüência de DNA e induzir morte celular por apoptose. Pretendemos estudar a resposta apoptótica em células humanas primárias, à luz UV, utilizando um vetor adenovírus recombinante expressando uma enzima CPD-fotoliase fusionada com a proteína repórter EGFP (vetor Adphr-EGFP), uma enzima que reconhece e repara especificamente lesões CPDs. Em células infectadas com este vetor Adphr-EGFP, pretende-se investigar o acesso a lesões CPDs in vivo pela enzima fotoliase e por enzimas participantes do reparo por excisão de nucleotídeos da célula, de modo a compreender deficiências em reparo de DNA e indução de apoptose por UV em células de pacientes Xeroderma pigmertosum e sindrome de Cockayne. (AU)