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Avaliação dos efeitos da radiação gama na expressão de genes reguladores da recombinação V(D)J de receptores de células T (TCR V beta 8.1)

Processo: 00/09994-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2000
Vigência (Término): 30 de abril de 2004
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
Pesquisador responsável:Geraldo Aleixo da Silva Passos Júnior
Beneficiário:Renato Sousa Cardoso
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil

Resumo

Neste projeto tentaremos atribuir novas funções a genes já conhecidos e descobrir "novos" genes envolvidos na recombinação V(D)J de receptores de células T (TCR VB8.1-DB2.1). Os genes cujas funções já estão associadas ao controle da recombinação V(D)J e que selecionamos para o estudo são RAG-1 e RAG-2, Ku70 e Ku86, DNA-PKcs, XRCC4, ILs e retrovírus MMTV (superantígeno). Procuraremos novos genes através da análise dos níveis de expressão de células T em desenvolvimento usando "DNA-arrays". Os ensaios serão com timos fetais murinos coletados no 14o dia de gestação e mantidos in vitro. Faremos extrações de DNA genômico e de RNA total em diferentes fases de cultivo do órgão. As amostras de DNA serão utilizadas nos ensaios de recombinação e de RNA na expressão gênica. O ensaio de recombinação V(D)J será entre TCR VB8.1 e DB2.1, pois estes segmentos se rearranjam em épocas diferentes da gestação entre linhagens murinas e durante o curso do desenvolvimento fetal apresentam padrões distintos de rearranjos. Com o intuito de modularmos a expressão dos genes acima indicados e dos vários outros apontados pelos "DNA-arrays", faremos uso dos raios gama de 60Co, irradiando os timos em cultura e avaliando os níveis de expressão gênica e a ocorrência de recombinação V(D)J. Os resultados fornecerão uma idéia mais clara sobre o controle dos rearranjos gênicos de TCR auxiliando a compreensão dos mecanismos que geram a diversidade dos linfócitos T. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CARDOSO‚ R.S.; JUNTA‚ C.M.; MACEDO‚ C.; MAGALHÃES‚ D.A.R.; SILVEIRA‚ E.L.V.; PAULA‚ M.O.; MARQUES‚ M.; MELLO‚ S.S.; ZÁRATE-BLADÉS‚ C.R.; NGUYEN‚ C.; OTHERS. Hybridization signatures of gamma-irradiated murine fetal thymus organ culture (FTOC) reveal modulation of genes associated with T-cell receptor V (D) J recombination and DNA repair. Molecular Immunology, v. 43, n. 5, p. 464-472, 2006.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
CARDOSO, Renato Sousa. Avaliação dos efeitos da radiação gama na expressão de genes reguladores da recombinação V(D)J de receptores de células T. 2004. 172 f. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.

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