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Estudos de propriedades conformacionais de domínios do receptor do hormônios luteinizante/gonadotropina coriônica e da interação da região C-terminal do receptor AT1A de angiotensina II com a região C-terminal da subunidade G alfa da proteína G

Processo: 00/04403-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de julho de 2000
Vigência (Término): 30 de junho de 2002
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Shirley Schreier
Beneficiário:Fábio Casallanovo
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:96/01451-9 - Anestésicos locais: síntese, propriedades estruturais e físico-químicas e interação com membranas modelo e biológicas, AP.TEM

Resumo

Serão realizados dois projetos durante o doutorado. No primeiro, em continuação ao projeto desenvolvido durante o mestrado, serão examinadas as propriedades conformacionais do fragmento N-terminal da sexta hélice transmembranar do receptor do hormônio luteinizante, KMAILIFTDFT, resíduos 570 a 580 e de dois de seus mutantes, Asp578Gly e Asp578Tyr, associados à doença síndrome da puberdade precoce masculina. As propriedades conformacionais desses peptídeos serão estudadas na presença de vesículas fosfolipídicas por dicroísmo circular (CD) e fluorescência, no caso do peptídeo contendo Tyr. Para este último será medido o tempo de vida de fluorescência em solução aquosa, na presença de detergentes e de membranas fosfolipídicas e serão realizados experimentos de supressão de fluorescência na presença de vesículas fosfolipídicas com acrilamida (aquossolúvel) e marcadores de spin fosfolipídicos (lipossolúveis). No segundo projeto serão examinadas as propriedades conformacionais do fragmento C- terminal da subunidade alfa da proteína G, FAAVKDTILLQLNLKEYNLV, resíduos 340-360, em solução aquosa e na presença de membranas modelo, assim como sua interação com o fragmento C-terminal do receptor AT1A do receptor de angiotensina II, LFYGFLGKKFKKYFLQLLKYI, resíduos 300-320. Estes experimentos serão realizados por CD e por fluorescência. (AU)

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